PTEN對胰島素抵抗的骨骼肌細胞調亡的影響及吡格列酮的干預研究.pdf

1、2型糖尿病的主要發(fā)病機制為胰島素抵抗。胰島素抵抗主要發(fā)生在受體后信號傳導障礙。PI-3K/PKB/AKt通路為胰島素信號的主要傳導通路，發(fā)生胰島素抵抗時，該通路活性是降低的。該通路也是促進細胞增殖、生長、存活的主要通路[1]。第10號染色體缺失并與張力蛋白同源的磷酸酶(phosphatase and tensionhomolog deleted on chromosome ten，PTEN)參與PI3-K通路已被證明有胰島素信號傳導的負

2、面作用[2]。PTEN是PI3K/PKB/AKt通路的一個重要的負性調控因子。PTEN/PI3K/Akt構成一個重要途徑，調節(jié)多種生物過程，如細胞凋亡，代謝，細胞增殖和細胞生長[3]。有研究發(fā)現(xiàn)，細胞內PTEN激活，可抑制AKt活性和誘導細胞凋亡[4]。
　　 吡格列酮屬于噻唑烷二酮(vthia-zolidinedione，TZD)類胰島素增敏劑，其主要作用機理為激活脂肪、骨骼肌和肝臟等胰島素作用組織的過氧化物酶體增殖物激活受體

3、γ(PPAR-γ)，增加靶細胞對胰島素的敏感性，降低胰島素抵抗。PTEN啟動子上游10kb處有兩個PPARγ的結合位點，被PPARγ激動劑激活的PPARγ可通過與這兩個結合位點結合促進PTEN的表達[5]。本研究觀察吡格列酮干預的胰島素抵抗大鼠骨骼肌細胞PTEN和Akt磷酸化蛋白的表達和細胞凋亡。從而探討PTEN與胰島素抵抗和細胞凋亡之間關系及其藥物作用機制。
　　 材料與方法：
　　 傳代培養(yǎng)大鼠骨骼肌細胞，棕櫚酸作用

4、于細胞制備胰島素抵抗模型，吡格列酮作用于胰島素抵抗模型的細胞進行藥物干預，給予胰島素刺激15min。設立正常細胞組(C組)、胰島素抵抗組(IR組)、胰島素抵抗+吡格列酮組(IR+TZDs組)。Western blot方法檢測各組PTEN、PTEN磷酸化、Akt磷酸化的表達。流式細胞儀檢測各組細胞凋亡率。
　　 結果：
　　 1、胰島素抵抗組與正常細胞組比較PTEN、PTEN磷酸化的蛋白表達增加，p-AKt蛋白表達減少。<

5、br>　　 2、吡格列酮作用于胰島素抵抗組細胞進一步增加PTEN、PTEN磷酸化蛋白表達，p-AKt蛋白表達增加。
　　 3、胰島素抵抗組與正常組比較凋亡明顯增多，吡格列酮作用于胰島素抵抗組進一步加重細胞凋亡。
　　 結論：
　　 1、胰島素抵抗骨骼肌細胞PTEN及其磷酸化表達增加，影響細胞凋亡。
　　 2、PTEN基因可通過抑制AKt磷酸化參與胰島素抵抗的發(fā)生。
　　 3、吡格列酮可增加Akt