來(lái)源于腸桿菌的巨大套索多肽的生物合成.pdf

1、在眾多微生物天然藥物中，核糖體多肽類藥物(RiPPs)是重要的一類。RiPPs是由核糖體合成，經(jīng)由翻譯后修飾而得到的一大類天然產(chǎn)物，具有非常廣泛的結(jié)構(gòu)多樣性和生物活性多樣性。這些多肽類藥物良好的抗菌活性及獨(dú)特的作用機(jī)制引起了廣泛關(guān)注，使這類化合物成為抗感染藥物研究的一個(gè)熱門的方向。在眾多核糖體多肽類藥物中，套索多肽相較于其它化學(xué)物，具有較為簡(jiǎn)單的修飾。然而其獨(dú)特的“套索”狀結(jié)構(gòu)引起了眾多關(guān)注。這種獨(dú)特的三級(jí)結(jié)構(gòu)給套索多肽類藥物帶來(lái)了獨(dú)特

2、的穩(wěn)定性及抗菌活性。
　　本實(shí)驗(yàn)研究以腸桿菌為研究對(duì)象，挖掘探索新穎的套索多肽類抗生素。首先通過(guò)基因組挖掘的方法找到了來(lái)源于腸桿菌的套索多肽，通過(guò)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)，這種套索多肽有可能是世界上最大的一個(gè)套索多肽，總共由多達(dá)24個(gè)氨基酸組成。將這種巨大套索多肽的基因簇克隆到pET41上，并在大腸桿菌宿主中表達(dá)，經(jīng)過(guò)質(zhì)譜分析，成功得到可以產(chǎn)套索多肽化合物的重組菌，并確定最優(yōu)發(fā)酵條件，在37℃下培養(yǎng)5h后誘導(dǎo)三天，套索多肽化合物的產(chǎn)量最高。