日本囊對蝦中TLRs-TRAF6-ECSIT泛素化-DORSAL-IE1信號途徑鑒定及其功能研究.pdf

1、研究背景：
　　先天免疫是動物啟動適應性免疫應答的基礎，由于無脊椎動物僅具有先天免疫系統(tǒng)，所以最初關于動物先天免疫機理的研究主要在無脊椎動物中進行，并且經(jīng)過長期的努力獲得了飛躍性的進展。在先天免疫調控過程中，對病原分子的識別是宿主非常重要的第一道防線。Toll樣受體(Toll-like receptor，TLR)是細胞上存在的一種普遍而且重要的先天免疫相關的模式識別受體。哺乳動物的不同TLR受體可以識別不同病原表面的病原相關分子模

2、式(pathogenassociated molecular pattems，PAMPs)。宿主識別不同的PAMPs后，引發(fā)下游不同的信號傳遞，進而引起下游的核轉錄因子激活與免疫效應因子如促炎癥細胞因子的表達。在無脊椎動物中，果蠅的Toll信號途徑最早被發(fā)現(xiàn)并報道，但與脊椎動物的TLR信號途徑相比，對其信號識別和傳遞過程，還有許多未知的地方。自1992年以來，以對蝦為代表的無脊椎動物海產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速但病害頻發(fā)，尤其是白斑綜合征病毒(W

3、SSV)，其對對蝦養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大經(jīng)濟損失。鑒于此，多國科研人員紛紛開展對蝦抗病毒免疫機理的研究。近年來，對蝦免疫系統(tǒng)的多種相關信號蛋白分子的功能已經(jīng)被逐漸揭示出來，但是大部分研究還是針對單基因功能與表達水平的研究，沒有形成對蝦中免疫信號傳遞過程的系統(tǒng)認識。例如，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)對蝦中存在多種TLR受體可能參與病原感染，但是這些受體是否在病毒感染中發(fā)揮作用，其引發(fā)的下游信號傳導過程如何都還有待研究。
　　科學問題及意義：
　　本

4、論文中，我們將根據(jù)實驗要求運用多種生物化學與分子生物學手段，鑒定出對蝦中參與識別病毒感染的重要MjTLR受體，并揭示病毒感染所引發(fā)的信號轉導過程中重要的功能蛋白以及這些蛋白發(fā)揮作用的分子機理。為了解對蝦中病毒感染相關信號途徑的轉導和控制對蝦病毒病以及提高對蝦的先天免疫提供幫助。
　　結果及創(chuàng)新點總結：
　　研究結果表明日本囊對蝦中存在一條TLR3-TRAF6/Ecsit泛素化-Dorsal-ie1促進病毒復制信號途徑。MjT

5、LR3識別病毒感染感染后，促進日本囊對蝦中MjTRAF6的上調表達、泛素化增加和與MjEcsit的相互作用的增加。MjTRAF6通過RING結構域與MATH結構域與MjEcsit相互作用，而其TRAF結構域不與MjEcsit相互作用;病毒感染促進MjTRAF6的泛素化進而介導MjEcsit的泛素化，泛素化的MjEcsit與MjDorsal相互作用增加，且入核增加，在核內泛素化的MjEcsit通過蛋白酶體依賴的途徑被降解，釋放MjDors

6、al與病毒ie1啟動子結合促進ie1基因的轉錄并促進病毒的復制，降低對蝦存活率。MjTLR1則通過引發(fā)相反的信號傳遞過程抑制這一信號傳遞，進而抑制病毒的復制，提升對蝦的存活率。而MjTLR2的功能則不明顯。
　　研究的創(chuàng)新點:
　　1、闡明了對蝦中三種MjTLRs在WSSV感染中的不同作用，MjTLR1和MjTLR3分別啟動抑制和促進病毒復制的信號途徑;MjTLR2則作用不明顯;
　　2、闡明了在日本囊對蝦中，功能蛋白