馬雌酚對人卵巢癌細(xì)胞SKOV-3增殖的抑制作用及機制研究.pdf

1、[目的]觀察馬雌酚對人卵巢癌細(xì)胞株SKOV-3細(xì)胞增殖的抑制作用，并探討其作用機制。 [方法]用不同濃度（10-8M、10-7 M、10-6 M、10-5 M、5×10-5 M、10-4M）馬雌酚處理SKOV-3細(xì)胞，測定各實驗組細(xì)胞存活率、細(xì)胞凋亡率以及細(xì)胞周期變化；檢測不同基因（Bcl-2、Bax、c-myc）mRNA的表達(dá)水平和磷酸化ERK1/2蛋白表達(dá)水平。利用馬雌酚、U0126（ERK通路特異性抑制劑）和ICI182，

2、780（雌激素受體抑制劑）處理細(xì)胞，觀察細(xì)胞磷酸化ERK1/2蛋白表達(dá)水平。從細(xì)胞、基因和蛋白質(zhì)水平上，了解馬雌酚對SKOV-3細(xì)胞增殖的抑制作用及其可能的分子機制。 [結(jié)果]各實驗濃度組的馬雌酚處理細(xì)胞后，細(xì)胞存活率隨著馬雌酚作用濃度和時間的增加而降低，其中10-4M馬雌酚作用細(xì)胞72h后細(xì)胞存活率為6.08％。 與對照組相比，馬雌酚劑量組細(xì)胞凋亡率明顯增加，并將SKOV-3細(xì)胞阻滯于G2/M期。 在馬雌酚10

3、-7 M～10-4M濃度范圍內(nèi)，抗凋亡基因Bcl-2的表達(dá)水平隨著馬雌酚處理濃度的增加呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢，促凋亡基因Bax的表達(dá)水平隨著馬雌酚處理濃度的增加而逐漸升高，原癌基因c-myc隨著馬雌酚處理濃度的增加呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢，提示馬雌酚能夠促進SKOV-3細(xì)胞的凋亡。 不同濃度（10-7 M、10-6 M、10-5 M、5×10-5 M、10-4M）馬雌酚處理SKOV-3細(xì)胞，總ERK蛋白表達(dá)量不變，p-ERK的表達(dá)量隨馬雌

4、酚處理濃度的增加而逐漸降低。與對照組相比，用U0126處理1h后再用50μmol/L馬雌酚處理2h，能夠降低p-ERK的表達(dá)量；用ICI182，780處理1h后再用50μmol/L馬雌酚處理2h，與對照組相比，單獨使用ICI182，780、馬雌酚與同時使用均能夠降低p-ERK的表達(dá)量。 [結(jié)論]馬雌酚顯著抑制SKOV-3細(xì)胞的增殖，抑制作用可能通過下調(diào)磷酸化ERK蛋白、Bcl-2和c-myc基因的表達(dá)，上調(diào)Bax表達(dá)來實現(xiàn)。馬雌