131I-herceptin對卵巢癌細胞skov-3的化療增敏作用.pdf

1、目的:卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一,雖然發(fā)病率僅占第三位,但其死亡率位居婦科惡性腫瘤之首,5年生存率約為30%,且病死率有逐年增加的趨勢。卵巢癌由于發(fā)現(xiàn)較晚,手術(shù)時機多已失去,普通的化療、放療由于化療藥物耐藥及放療抵抗等原因,療效有限。本實驗通過免疫靶向治療的方法,探索Her-2高表達類型卵巢癌的新治療方法。觀察131I標記的曲妥珠單抗(trastuzumab,商品名herceptin)對Her-2高表達的卵巢癌細胞skov-3

2、的化療增敏作用。
　　 方法:應用Iodogen法將131I標記到herceptin上,并測定放化學純度、放射性濃度、免疫結(jié)合率、Herceptin標記率、放射性比活度進行質(zhì)量控制,制備131I-herceptin。實驗設(shè)空白組、131I-herceptin組、順鉑(DDP)組、131I-herceptin和順鉑(DDP)聯(lián)合組。MTT‘法測定不同濃度順鉑(DDP)和131I-herceptin以及順鉑(DDP)和131I-he

3、rceptin聯(lián)合對skov-3的生長抑制率,并畫出生長抑制率曲線。流式細胞儀分別測四組不同處理的凋亡率。采用免疫組化法分別檢測未處理的skov-3和131I-herceptin作用48小時后的skov一3的Her2和survivin表達情況,并比較作用前后的表達率。
　　 結(jié)果:MTT法測得順鉑(DDP)生長抑制率并根據(jù)生長抑制率曲線得出4.685μg時為80%、3.760μg時為70%、2.75μg時為60%、2.320μg

4、時為50%、2.020μg時為40%、1.560μg時為30%、1.130μg時為20%。MTT法測得131I-Herceptin生長抑制率,根據(jù)生長抑制率曲線得出生長抑制率為10%時131I-Herceptin的濃度為0.75×105Bq/ml。MTT法測得各濃度聯(lián)合組的生長抑制率明顯高于相加組,P<0.05。應用金氏公式計算各組DDP與131I-Herceptin相互作用q值,得出q值均大于1。根據(jù)CDI(兩藥相互作用指數(shù))計算得出

5、各聯(lián)合組CDI(兩藥相互作用指數(shù))均小于1。流式細胞儀測得skov-3細胞的凋亡率隨藥物濃度的降低而減小。各濃度聯(lián)合組的凋亡率要明顯高于單藥順鉑(DDP)組和131I-Iterceptin組,P<0.05。并且各濃度聯(lián)合組的凋亡率明顯高于相加組,P<0.05。131I-Herceptin組處理后Her-2標記指數(shù)由36%降至21%,survivin基因標記指數(shù)由21%降至12%。
　　 結(jié)論:1.131I-herceptin對卵