沉默ATF5對卵巢癌細胞skov-3裸鼠成瘤的研究.pdf

1、目的:分析慢病毒轉染沉默人轉錄激活因子5(Activating transcription factor5，ATF5)后，對卵巢癌SKOV-3細胞體外增殖、凋亡及體內成瘤的影響，通過體外和體內的實驗研究來探討卵巢癌的基因治療，探索沉默ATF5的表達后，能否開辟卵巢癌治療的新方法。
　　方法:
　　1、慢病毒攜帶小于擾RNA，分別將構建好的攜帶RNA干擾質粒(沉默ATF5)和空載體的慢病毒感染生長良好的卵巢癌SKOV-3細胞和

2、卵巢癌SKOV-3細胞進行對照，對比觀察細胞的生長狀態(tài)。
　　2、MTT法檢測細胞的增殖生長。
　　3、羅氏凋亡檢測試劑盒檢測細胞凋亡。
　　4、采用裸鼠皮下接種細胞的方法，于裸鼠皮下接種成瘤，觀察各組裸鼠的存活狀態(tài)、種植瘤生長情況，進一步計算成瘤率。
　　5、RT-PCR檢測移植瘤ATF5 mRNA的表達情況。
　　6、Western-Blot檢測移植瘤ATF5蛋白的表達情況。
　　7、HE染色觀察

3、瘤組織組織學變化。
　　結果:
　　1、在體外培養(yǎng)條件下，SKOV-3的生物學形態(tài)沒有明顯差異。在相同培養(yǎng)時間內細胞的增殖無統(tǒng)計學意義，但RNA干擾的實驗組細胞凋亡數量較其他兩組明顯增多。
　　2、皮下接種成瘤后，三組裸鼠的成瘤率沒有明顯區(qū)別，但RNA干擾組腫瘤成瘤時間晚，生長緩慢。
　　3、移植瘤組織RT-PCR顯示RNA干擾組mRNA表達量與其他對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);
　　4、瘤組