不同途徑和時段輸注BMMSC對臍血CIK-NK細胞在荷瘤小鼠體內(nèi)抗腫瘤效應的影響.pdf

1、中山大學碩士學位論文不同途徑和時段輸注BMMSC對臍血CIK/NK細胞在荷瘤小鼠體內(nèi)抗腫瘤效應的影響姓名：王瀟娉申請學位級別：碩士專業(yè)：兒科學指導教師：黎陽20090520中山大學 不同途徑和時段輸注B M M S C 對臍血C I K ／N K 細胞在荷瘤小鼠體內(nèi)抗腫瘤效應的影響在放療、化療或H S C T 后間隔2 “ - - 4 周。雖然B M M S C 和C I K ／N K 等免疫效應細胞使用時間并不重疊，但是如果體內(nèi)長期存

2、活的B M M S C 可以抑制后期輸入的C I K ／N K細胞的抗腫瘤效應，削弱其過繼細胞免疫治療的療效，將對惡性血液病患者的預后十分不利。如何制定達到最佳促進植入及G V L 效應的B 刪S C 及C I K ／N K 細胞共同移植策略仍需深入探討。本實驗旨在利用N O D ／S C I D d x 鼠荷瘤模型證實分別使用不同的輸注途徑( 如將B 刪S C 骨髓腔注射，C I K ／N K 細胞靜脈輸注) 以及臨床上目前已經(jīng)開始應

3、用的非同步輸注( B M M S C 和C I K ／N K 細胞的輸注時間一前一后各自錯開) 能避免B M M S C 對C I K ／N K 細胞的負性影響，達到既保留B 刪S C 對H S C T 后的造血恢復促進作用和C I K ／N K 細胞的抗腫瘤活性，又不至于增力f l G V H D 、造血延遲發(fā)病率以及移植后惡性血液病復發(fā)率的雙重目的，這對B 刪S C 和C I K ／N K 細胞將來在惡性血液病患者的臨床合理應用具有

4、十分重要的意義。材料和方法1 ．實驗對象5 - - - 6 周齡，體重2 0 “ - 2 5 9 的N O D ／S C I D 小鼠，雌雄不限：來自中山大學中山醫(yī)學院動物實驗中心( 符合S P F 標準) 。2 ．標本來源骨髓( B M ) ：取自2 0 ～3 0 歲健康志愿者。臍血( C B ) ：來自本院健康足月妊娠產(chǎn)婦經(jīng)產(chǎn)道分娩之胎兒臍靜脈血。K 5 6 2 細胞株：來自本實驗室( 臍血庫) 凍存的K 5 6 2 細胞株。3 ．

5、實驗方法3 ．1 單個核細胞分離采用F i c o l 卜H a p a q u e 分離法。3 ．2 誘導擴增C I K ／N K 細胞將收集到的臍血單個核細胞置于含有F L T - 3 、S C F 、I L - 2 、I L - 7 、I L - 1 5 五種細胞因子的培養(yǎng)體系中誘導2 1 d 。其中：1 ) 細胞因子的終濃度：F L T 一3 、S C F 、I L 一7 、I L 一1 5 為4 0 n g ／m l ，I L