2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩59頁未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、白念珠菌是念珠菌病原體中最常見的一種條件性致病菌,白念珠菌應(yīng)答的-個(gè)主要環(huán)境因素為細(xì)胞外的pH,這種應(yīng)答反應(yīng)是由保守的真菌信號(hào)傳導(dǎo)途徑RIM101途徑所控制,許多依賴pH表達(dá)的基因受轉(zhuǎn)錄因子Rim101蛋白所調(diào)控。從宿主中獲得鐵的能力對于白念珠菌的定居和存活是必需的。白念珠菌鐵獲得系統(tǒng)的調(diào)控對其生存和毒力非常重要,而細(xì)胞外的不同pH條件影響著鐵離子的生物可利用率,因此推測鐵獲得系統(tǒng)受轉(zhuǎn)錄因子Rim101蛋白調(diào)控。 通過對白念珠菌

2、高鐵還原酶基因FRP1啟動(dòng)子進(jìn)行突變分析,確認(rèn)啟動(dòng)子中特殊調(diào)控元件。DNA微陣列結(jié)果顯示FRP1表達(dá)受Rim101蛋白調(diào)控。我們通過分析FRP1起始密碼子上游1K序列發(fā)現(xiàn)在-160和-650處有兩個(gè)推測的Rim101p結(jié)合位點(diǎn),對其分別進(jìn)行定點(diǎn)突變,然后構(gòu)建啟動(dòng)子與報(bào)告基因1acZ融合質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化整合到白念珠菌,rim101-/-株和野生株中,檢測不同缺鐵條件下β-半乳糖苷酶活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)堿性條件,Rim101p能夠正向調(diào)控FRP1的表達(dá)

3、:啟動(dòng)子-160處突變對啟動(dòng)子功能影響較弱,而-650突變使啟動(dòng)子活性大大降低,此結(jié)果和雙突變的結(jié)果相同,表明Rim101p主要通過與啟動(dòng)子-650處結(jié)合位點(diǎn)相互作用來調(diào)控FRP1的表達(dá)。 為了驗(yàn)證Rim101p是否直接結(jié)合GCCAAG位點(diǎn),利用白念珠菌細(xì)胞總蛋白提取物進(jìn)行EMSAs實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Rim101p能直接與-160和-650探針結(jié)合,不同的培養(yǎng)條件(pH)不影響結(jié)合。將全長Rim101p和截短Rim101p分別在大腸桿菌中

4、成功表達(dá),重組蛋白EMSAs實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證Rim101p能直接結(jié)合GCCAAG位點(diǎn)。并且發(fā)現(xiàn)截短Rim101p只能與-650探針結(jié)合,說明截短(活性形式)Rim101p主要通過與啟動(dòng)子-650位點(diǎn)結(jié)合調(diào)控FRP1表達(dá),這與啟動(dòng)子突變結(jié)果一致。 為了尋找FRP1上游-822~-437和-263~124片斷中的特殊調(diào)控元件,本實(shí)驗(yàn)分別將片段與IMH3中性啟動(dòng)子連接,通過β-半乳糖苷酶活性的分析說明:-822~-437區(qū)域有促進(jìn)啟動(dòng)子

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論