和厚樸酚逆轉(zhuǎn)CNE2-DDP細胞裸鼠皮下移植瘤耐藥性的實驗研究.pdf

1、[目的]
　　 探討HNK對人鼻咽癌多藥耐藥細胞CNE2/DDP裸鼠皮下移植瘤多藥耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用及相關機制。
　　 [方法]
　　 (1)體外培養(yǎng)CNE2/DDP細胞，取對數(shù)生長期的細胞用于實驗研究。
　　 (2)建立CNE2/DDP細胞裸鼠皮下移植瘤模型。
　　 (3)40只裸鼠成瘤后隨機分成5組，每組8只，分別是生理鹽水對照組：予以生理鹽水10ml/(kg.d)；溶劑組：予以溶劑10ml/(

2、kg.d)；HNK組：予以HNK100mg/(kg.d)；DDP組：予以DDP2mg/(kg.d)；HNK+DDP組：予以HNK100mg/(kg.d)+DDP2mg/(kg.d)。其中，DDP每三天給藥一次，其他藥物每天一次，共計18天。
　　 (4)觀察荷瘤裸鼠的皮毛、食欲、活動狀況、對刺激的反應、腫瘤的生長情況，評價化療毒副反應和生存質(zhì)量。
　　 (5)采用HE染色，光鏡下觀察各組移植瘤組織的病理形態(tài)學變化。

3、>　　 (6)免疫組化SP法檢測各組移植瘤組織中蛋白P-gp、LRP、Bcl-2和Bax的表達。
　　 [結(jié)果]
　　 (1)生理鹽水組、溶劑組、和厚樸酚組、順鉑組、和厚樸酚+順鉑組給藥結(jié)束后裸鼠移植瘤的體積分別為1.653±0.225cm3、1.502±0.308 cm3、1.478±0.337 cm3、1.370±0.281 cm3、1.089±0.190 cm3，與生理鹽水組相比，溶劑組、和厚樸酚組腫瘤體積差異無

4、統(tǒng)計學意義(P>0.05)，順鉑組瘤體較小(P<0.05)，和厚樸酚+順鉑組瘤體更小(P<0.01)。
　　 (2)生理鹽水組、溶劑組、和厚樸酚組、順鉑組、和厚樸酚+順鉑組給藥結(jié)束后裸鼠移植瘤的瘤重分別為1.582±0.145g、1.445±0.227g、1.407±0.257g、1.301±0.124g、1.018±0.067g，與生理鹽水組相比，順鉑組、和厚樸酚+順鉑組移植瘤重較輕(P<0.05，P<0.01)，而溶劑組及和

5、厚樸酚單獨給藥組的瘤重與生理鹽水組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。順鉑組、和厚樸酚+順鉑組對荷瘤裸鼠的抑瘤率分別為17.76％、35.69％。
　　 (3)通過對腫瘤組織HE染色的觀察，可見對照組腫瘤體積大，異型性明顯，聯(lián)合用藥組胞核深染，核仁不明顯。
　　 (4)免疫組化SP法檢測：與對照組相比，和厚樸酚單獨給藥組及和厚樸酚+順鉑聯(lián)合用藥組腫瘤組織的P-gp，LRP蛋白的表達顯著降低(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學

6、意義；而溶劑組和順鉑組與對照組相比，其腫瘤組織中以上兩種蛋白表達無明顯差異(P>0.05)。
　　 (5)免疫組化SP法檢測：與對照組相比，和厚樸酚單獨用藥組、順鉑組及和厚樸酚+順鉑組腫瘤組織的Bcl-2蛋白的表達顯著降低(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義，且聯(lián)合用藥組腫瘤組織中Bcl-2表達較和厚樸酚單獨給藥組及順鉑組更低(P<0.05)。而溶劑組與對照組相比，其腫瘤組織中Bcl-2蛋白表達無明顯差異(P>0.05)。

7、　　 (6)免疫組化SP法檢測：與對照組相比，順鉑組及和厚樸酚+順鉑組腫瘤組織的Bax蛋白的表達顯著升高(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義；而溶劑組和HNK組與對照組相比，其腫瘤組織中Bax蛋白表達無明顯差異(P>0.05)；與順鉑組相比，聯(lián)合用藥組該蛋白的表達更高(P<0.01)。
　　 [結(jié)論]
　　 (1)HNK可以部分逆轉(zhuǎn)人鼻咽癌細胞CNE2/DDP荷瘤裸鼠皮下移植瘤的耐藥性。
　　 (2)HNK逆轉(zhuǎn)裸