HRM技術(shù)在炎癥性腸病患者TPMT基因多態(tài)性的檢測中的應(yīng)用性研究.pdf

1、背景：硫唑嘌呤是治療炎癥性腸病的常用免疫抑制劑，由于其嚴(yán)重的骨髓抑制毒副作用，已有的研究顯示該藥物副作用與硫嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶(TPMT)基因突變有關(guān)。 目的：應(yīng)用HRM技術(shù)檢測炎癥性腸病患者TPMT基因多態(tài)性，探索炎癥性腸病(IBD)患者TPM7基因型與硫唑嘌呤(AZA)致骨髓抑制的關(guān)系。 方法：采集了82例IBD患者和53例健康志愿者的外周血，使用QIAamp DNA B100d Minikit(德國Qiagen公司生產(chǎn)

2、)提取其中的DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)一高分辨熔解曲線(PCR-HRM)與Sanger法序列測定相結(jié)合的方法，檢測上述人群中3種常見的TPMT突變等位基因TPMT*3A(G460A/A719G)、TPMT*3B(G460A)、TPMT*3C(A719G)。 結(jié)果：臨床資料：82例IBD(UC 38例/CD 42例/IC 2例)，根據(jù)是否使用AZA治療分為A、B兩組。其中A組有31例患者，使用AZA的劑量為50-lOOmg/d，(男

3、20/女11)，平均年齡39.6(18-68)歲。健康對照組為C組(男28/女25)，平均年齡41.06(23-68)歲。A組與C組、B組與C組年齡無統(tǒng)計學(xué)差異。TPMT基因多態(tài)性檢測出了TPMT*1/,3C雜合子6例，占4.44％(6/135)：IBD患者(A+B組)中TPMT*1/*3C雜合子4例，占4.88％(4/82)，TPMT*3C基因頻率為2.44％。健康對照者(C組)中TPMq*3C雜合子2例，占3.77％(2/53)，T

4、PMY*3C基因頻率為1.89％。未檢測出TPMT*3A和TPMT*3B型突變。IBD患者的4例出現(xiàn)骨髓抑制的患者中，1例是TPMT*1/*3C雜合子；其余3例為TPMT野生型。另外檢測出了TPMT*1S(T474C)突變，IBD患者(A+B組)中TPMT*1S(T474C)純合型占1.96％，雜合型占35.85％，基因頻率為：C 19.81％。健康對照組(C組)中TPMT*1S(T474C)純合型占2.44％，雜合型占39.02％，基