大蒜新素抑制E2F表達(dá)在抗巨細(xì)胞病毒感染機(jī)制中的作用.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文大蒜新素抑制E2F表達(dá)在抗巨細(xì)胞病毒感染機(jī)制中的作用姓名：劉志峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：方峰20040401+ # 中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院 博士學(xué)位論文⑥用T J T V 3 0 0 型全自動(dòng)圖像分析儀測(cè)定各目的條帶的積分光密度值，以內(nèi)參照條帶進(jìn)行上樣量校正，以校正值K ( K = 目的條帶的積分光密度／a c t i n 條帶的積分?jǐn)烂芏? 對(duì)各目的條帶進(jìn)行半定量分析?！窘Y(jié)果】①H C M V 感

2、染對(duì)E 2 F 蛋白表達(dá)的影響：低M O I 和高M(jìn) O I 感染都可間斷上調(diào)宿主細(xì)胞E 2 F 蛋白表達(dá)，低M O I 感染的上調(diào)作用呈雙峰型，高峰出現(xiàn)在感染后2 h及1 6 h ：高M(jìn) O I 感染的上調(diào)作用呈三峰型，高峰出現(xiàn)在感染后2 h 、1 6 h 及2 4 h ：均以感染后2 h 上調(diào)幅度最高。高M(jìn) O I 感染的上調(diào)作用強(qiáng)于低M O I 感染。②H C M V 感染對(duì)d h f r 基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)的影響：低M O I 和高

3、M O I 感染在感染后2 4 h 內(nèi)上調(diào)d h f r m R N A 轉(zhuǎn)錄水平，低M O I 感染的上調(diào)作用表現(xiàn)為雙峰型，峰值分別出現(xiàn)在感染后4 h 和1 6 h ，高M(jìn) O I 感染的上調(diào)作用則在2 - 4 h 和1 6 h 較為明顯；D } ．i F R 蛋白表達(dá)也被上調(diào)，高M(jìn) O I 感染除在i f h 和2 4 f i 外，其余時(shí)段上調(diào)明顯，而低M O I 感染除在2 h ，1 6 h ，2 4 h 和7 2 h 外，其余時(shí)

4、段呈上調(diào)效應(yīng)，但不如高M(jìn) O I感染明顯。③大蒜新素處理正常細(xì)胞對(duì)E 2 F 蛋白及d h f r 基因轉(zhuǎn)錄和表達(dá)的影響：大蒜新素處理正常細(xì)胞后2 h 可誘導(dǎo)E 2 F 蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào)，其后還在1 6 h 及4 8 h ( 中劑量) 和2 0 h 及7 2 h ( 大劑量) 出現(xiàn)上調(diào)效應(yīng)，但上調(diào)幅度不如2 h 時(shí)明顯：d h f r 轉(zhuǎn)錄水平僅在處理后2 h 見到明顯上調(diào)：但D H F R 蛋白表達(dá)水平在處理后2 0 h 及4 8

5、 —9 6 h 呈現(xiàn)逐漸明顯上升趨勢(shì)。④大蒜新素處理H C M V 感染細(xì)胞對(duì)E 2 F 蛋白表達(dá)的影響：大蒜新素處理低M O I 和高M(jìn) O I 感染細(xì)胞可便病毒誘導(dǎo)上調(diào)的E 2 F 蛋白表達(dá)水平下調(diào)，大劑量藥物處理高M(jìn) O I 感染細(xì)胞2 h 和1 6 h 時(shí)E 2 F 蛋白回復(fù)至正常細(xì)胞水平，其作用特點(diǎn)為：藥物對(duì)高M(jìn) O I 感染細(xì)胞的拮抗作用優(yōu)于對(duì)低M O I 感染細(xì)胞的處理；大劑量藥物作用優(yōu)于中劑量藥物；對(duì)病毒在感染早期( 1

6、 6 h 內(nèi)) 誘導(dǎo)效應(yīng)的拮抗作用強(qiáng)于對(duì)病毒感染中期( 2 4 h ) 誘導(dǎo)效應(yīng)的拮抗。⑤大蒜新索處理N C M 7 感染細(xì)胞d h f r 基因轉(zhuǎn)錄和表達(dá)的影響：藥物處理高M(jìn) 0 [ 感染細(xì)胞4 —1 6 h 期間病毒誘導(dǎo)的d h f rm R N A 轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)作用可被拮抗：低M O I 感染的誘導(dǎo)效應(yīng)可被基本消除，但在高M(jìn) O I 感染2 h 時(shí)藥物無拮抗作用。藥物處理低M O I 感染細(xì)胞在4 - 1 2 h 內(nèi)可基本消除病毒