梭子蟹“乳化病”研究.pdf

1、“乳化病”是近年來梭子蟹養(yǎng)殖過程中發(fā)生的一種危害較大的暴發(fā)性流行病。為了搞清浙江沿海養(yǎng)殖梭子蟹“乳化病”的病原，找到有效的防治方法，本文針對該病進(jìn)行了研究，內(nèi)容包括流行病學(xué)調(diào)查、病原菌株的分離鑒定、人工感染試驗(yàn)、組織病理研究、生理學(xué)研究以及防治藥物篩選等，旨在為梭子蟹疾病的防治提供科學(xué)依據(jù)。 對秋冬季海捕暫養(yǎng)“乳化病”病蟹(每年的10月至翌年2月低水溫期)研究發(fā)現(xiàn)，病蟹蟹體消瘦，肌肉萎縮，在步足橫切斷口處有乳白色的液體流出，蟹蓋

2、內(nèi)可見大量乳白色液體。從乳白色液體內(nèi)能鏡檢出大量酵母菌樣微生物，菌體大小為2.3～7.8×1.3～6.5μm，多數(shù)呈卵圓形，細(xì)胞大多單個(gè)或成對排列，多邊芽殖。另外，在病蟹肌肉、心臟、肝胰臟以及鰓等部位也存在相同菌體。該菌可生長在TCBS上形成白色菌落，在孟加拉紅上形成紅色菌落，經(jīng)菌體形態(tài)、培養(yǎng)特性及生理生化反應(yīng)，參照Lodder[1970]的方法鑒定為假絲酵母菌屬酵母菌(Candidaoleophila)。人工感染試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，其能使健康蟹

3、發(fā)病，且表現(xiàn)出與自然感染病蟹癥狀相似的組織液乳白色癥狀，各試驗(yàn)組在感染后5-12天內(nèi)全部死亡。從感染蟹中重新分離出與感染菌形態(tài)、生理生化特征完全相同的菌株，表明此菌為秋冬季暫養(yǎng)期“乳化病”的病原。 對患有典型“乳化病”癥狀病蟹進(jìn)行了組織病理學(xué)研究。結(jié)果顯示，病蟹體液內(nèi)血淋巴數(shù)量急劇減少，血液不能凝聚，代之以大量的酵母菌；酵母菌在病蟹的肝胰腺、鰓、心臟中大量侵襲，并引起這些組織發(fā)生以壞死為主的變質(zhì)性病變，其病理特征主要表現(xiàn)為：細(xì)胞

4、腫脹、變性、壞死，某些細(xì)胞的細(xì)胞核固縮、碎裂或崩解。同時(shí)對乳化病的致病機(jī)理進(jìn)行了初步分析。 從忠“乳化病”的梭子蟹中分離肝胰腺、鰓、心肌及步足肌組織，并以健康梭子蟹組織為對照，根據(jù)各組織中水解酶、抗氧化酶、胞內(nèi)轉(zhuǎn)氨酶以及MDA含量等指標(biāo)為判斷依據(jù)，研究三疣梭子蟹患乳化病后主要病變組織中參與防御作用的酶活力變化。結(jié)果表明：在不同組織中的不同酶均出現(xiàn)了酶活力的顯著變化。認(rèn)為參與防御作用的酶活力標(biāo)準(zhǔn)可以作為乳化病檢測和病理分析的參考依

5、據(jù)。 開展了病原酵母菌防治藥物的篩選試驗(yàn)，通過對常用10種抗真菌藥物的敏感性試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)制霉菌素、新潔爾滅、甲醛、黃蓮和大蒜等5種藥物對病原酵母菌顯示出一定的抑菌效果，抑菌作用較強(qiáng)，在此基礎(chǔ)上測定了這5種優(yōu)選藥物的最小抑菌濃度MIC分別為制霉菌素4μg/mL、新潔爾滅4μg/mL、甲醛31.27μl/mL、黃蓮1：640、大蒜1：20。最低殺菌濃度MBC分別為制霉菌素8μ1/mL、新潔爾滅16μg/mL、甲醛62.54μL/mL、