奈必洛爾藥動(dòng)學(xué)及其手性代謝機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　本研究結(jié)合奈必洛爾主要代謝酶CYP2D6的基因多態(tài)性，研究其在中國(guó)人群的藥物動(dòng)力學(xué)特征及其手性代謝特征和機(jī)制。
　　方法:
　　血漿中奈必洛爾消旋體濃度采用LC-MS/MS法測(cè)定，對(duì)映體濃度采用手性柱進(jìn)行拆分后，采用LC-MS/MS法進(jìn)行測(cè)定。微粒體孵化體系中藥物及其代謝物濃度采用高效液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。采用PCR-RFLP方法進(jìn)行基因分型。
　　藥動(dòng)學(xué)研究中，篩選16例受試者，其中CYP2D6*10

2、突變純合子8例，野生型純合子3例，突變型雜合子5例。采用自身對(duì)照法進(jìn)行試驗(yàn)，單次給藥劑量為5mg、10mg;多次給藥為每天給藥1次，每次5mg，連續(xù)7天。在不同時(shí)間采樣，測(cè)定血藥濃度，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
　　體外代謝機(jī)制研究采用重組酶法和微粒體酶法，考察消旋體的酶催化機(jī)制及各對(duì)映體代謝的酶催化機(jī)制。
　　手性藥動(dòng)學(xué)研究中，篩選基因分型符合規(guī)定的8例受試者（以CYP2D6*10突變位點(diǎn)和CYP2C19*2突變位點(diǎn)篩選基因型）。受

3、試者基因型分別為CCAA、CCGG、TTAA、TTGG，各2例。單次口服給予10mg奈必洛爾后，采集血樣，測(cè)定藥物濃度，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果:
　　LC-MS/MS法測(cè)定血漿中藥物濃度方法學(xué)可行，符合生物樣本測(cè)試的要求。采用手性柱可以有效分離血漿中奈必洛爾對(duì)映體，收集分離液后可以通過(guò)LC-MS/MS法進(jìn)行測(cè)定奈必洛爾對(duì)映體濃度。
　　在中國(guó)人群中，奈必洛爾在5mg～10mg劑量范圍內(nèi)符合線性動(dòng)力學(xué)過(guò)程，5mg多次

4、給藥也符合線性動(dòng)力學(xué)過(guò)程累加，藥動(dòng)學(xué)參數(shù)與國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道一致。CYP2D6*10突變受試者，藥物暴露有明顯增加趨勢(shì)，受個(gè)體差異和受試者例數(shù)等因素的影響，沒(méi)有顯示出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　體外試驗(yàn)證實(shí)，CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4對(duì)奈必洛爾的代謝都有催化作用，CYP2D6和CYP2C19是主要催化酶，其中CYP2D6主要催化左旋體的代謝，CYP2C19主要催化右旋體的代謝。
　　體內(nèi)手性代謝研究結(jié)果顯示，CYP2D6*1