普萘洛爾對骨代謝影響的初步研究.pdf

1、目的：本實驗旨在研究普萘洛爾對兔成骨細胞的增殖和分化及破骨細胞形成的影響，探討普萘洛爾對骨代謝的影響機制,為更深入認識普萘洛爾在骨代謝中發(fā)揮的作用提供線索和依據(jù)。
　　方法：（1）提取兔骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs），誘導(dǎo)為成骨細胞（OB），并通過ALP染色和茜素紅染色對其進行鑒定。（2）以兔OB為體外實驗?zāi)Ｐ?，以不同濃度普萘洛爾?0-2μmol/ml，10-3μmol/ml，10-4μmol/ml）分別刺激體外培養(yǎng)的兔OB后，

2、用MTT法檢驗普萘洛爾對兔OB增殖能力的影響，用RT-PCR法檢驗成骨細胞中OPG和RANKL mRNA的表達，用ELISA檢測上清液中OPG和RANKL蛋白的含量。（2）分離培養(yǎng)兔破骨細胞(OC)，以不同濃度普萘洛爾(10-2μmol/ml，10-3μmol/ml，10-4μmol/ml)分別刺激體外培養(yǎng)的兔OC72h后，用TRAP及甲苯胺藍染色檢測其對OC的影響。
　　結(jié)果：1）通過ALP染色和茜素紅染色證實所誘導(dǎo)的為成骨細胞

3、；2）與不加普萘洛爾的對照組相比，不同濃度的普萘洛爾給藥48h,72h,OD值均高于對照組(P＜0.05)，有統(tǒng)計學(xué)意義；96h后實驗組OD值均低于對照組(P>0.05)，沒有統(tǒng)計學(xué)意義，并且48h和72h時在普萘洛爾10-3μmol/ml時,OD值最大(P＜0.05)；3）ELISA和RT-PCR結(jié)果均顯示普萘洛爾作用于成骨細胞后，OPG含量均高于對照組，RANKL則相反，OPG/RANKL的比值實驗組也均高于對照組。4）與對照組相比