懸浮芯片技術(shù)檢測腹瀉病原體和MALDI--TOF MS鑒定腹瀉病原菌的臨床應(yīng)用評估.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級碩士學(xué)位論文懸浮芯片技術(shù)檢測腹瀉病原體和MALDlTOFMS鑒定腹瀉病原菌的臨床應(yīng)用評估ClinicalevaluationofxTAGGPPforsimultaneousenteropathogensdetectionandofMALDI—TOFMSforrapididentificationofenteropathogenicbacteria課題來源：國家重大科技專項課題(2012ZXl0004—213)學(xué)位申

2、請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會主席答辯委員會委員鄧間開車小燕富寧I各床檢驗診斷學(xué)專業(yè)型碩士研究生第二臨床醫(yī)學(xué)院吳玉章江麗芳曾其毅裘宇容溫旺榮2014年5月5日廣州摘要僅操作繁瑣、耗時，且需要大量生物學(xué)材料。此外，基于生化試驗的腹瀉病原菌種水平鑒定結(jié)果尚不能做到完全準(zhǔn)確。臨床實驗室急需尋找快速且準(zhǔn)確的腹瀉病原菌鑒定新方法?，F(xiàn)代臨床微生物實驗室發(fā)展的迫切需要體現(xiàn)如下：快速檢測與報告結(jié)果的時效性，檢驗流程標(biāo)準(zhǔn)化，加強與

3、臨床緊密溝通。近幾年，為適應(yīng)臨床需要，許多臨床應(yīng)用檢驗診斷技術(shù)的研發(fā)均以快速、高通量檢測為首要目的，其中成果較為突出、臨床應(yīng)用前景較為廣闊的是懸浮芯片技術(shù)和基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(MALDITOFMS)技術(shù)。懸浮芯片技術(shù)是唯一被美國食品與藥物管理局批準(zhǔn)用于臨床診斷的新型生物芯片產(chǎn)品。該技術(shù)作為一種新型、高通量的生物芯片技術(shù)，將流式細(xì)胞術(shù)、激光技術(shù)及應(yīng)用流體學(xué)等技術(shù)結(jié)合在一起，利用懸浮在液相中的分類熒光編碼微球作為檢測載體，具有

4、高通量、速度快、靈敏度高、重復(fù)性好、特異性強、多重檢測等特點。在臨床上，懸浮芯片技術(shù)可用于各種呼吸道病毒、手足口病毒、致病菌和遺傳病的基因檢測，以及抗原抗體定性定量檢測、細(xì)胞因子檢測和激素水平檢測。當(dāng)前，國外已研發(fā)成功了一系列商品化檢測試劑盒并應(yīng)用于臨床診斷。基于懸浮芯片技術(shù)研發(fā)的xTAGGastrointestinalPathogenPanel(xTAGGPP)是L缸ninex公司于2011年推出的腹瀉病原體基因檢測試劑盒。該試劑盒于

5、2013年獲得FDA批準(zhǔn)，在國內(nèi)外臨床診斷實驗室的應(yīng)用處于初步探索階段，國內(nèi)尚未見到有關(guān)其臨床應(yīng)用的報道。MALDITOFMS作為一種新的微生物鑒定方法，基于細(xì)菌的蛋白質(zhì)指紋圖譜的特征峰譜進(jìn)行鑒定，打破了常規(guī)鑒定方法操作繁瑣且耗時的特點，極大地簡化了鑒定流程，鑒定過程自動化。在臨床診斷實驗室，MALDITOFMS用于臨床分離細(xì)菌和真菌鑒定，不僅縮短了鑒定時長，同時具有較高的鑒定正確率。由于儀器昂貴，一次性投入成本高，MALDITOFMS