河南省雞腹瀉重要病原菌的分離鑒定與耐藥性及PCR檢測(cè)方法的研究.pdf

1、雞腹瀉是由多種因?yàn)橐痣u的以拉稀、下痢為特征的一類疾病的總稱。多年來(lái)一直困擾著養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展,對(duì)經(jīng)濟(jì)效益的影響很大,應(yīng)引起高度重視。引起雞腹瀉的因素多而復(fù)雜,但傳染性腹瀉占主導(dǎo)因素。同時(shí)該病是養(yǎng)雞場(chǎng)的常見病、多發(fā)病、并發(fā)病,防治最困難的疫病之一。所以,對(duì)引起雞腹瀉的重要病原菌盡早做出準(zhǔn)確診斷,采取有效的預(yù)防和治療措施成為控制本病的關(guān)鍵。本研究以此為出發(fā)點(diǎn),首先通過(guò)常規(guī)微生物學(xué)方法對(duì)雞腹瀉重要病原菌的類型、各病菌所占的比例、生化特性、致病性

2、、血清型和耐藥性進(jìn)行調(diào)查分析,并建立了病原菌的PCR檢測(cè)方法,并進(jìn)行臨床應(yīng)用,旨在為雞腹瀉的診斷提供重要條件和可靠依據(jù)。
　　 本課題從河南省20個(gè)地區(qū)94個(gè)雞場(chǎng)采集的310份雞腹瀉病料為研究材料,開展了雞腹瀉重要病原菌的研究,并取得了預(yù)期結(jié)果:
　　 1、通過(guò)微生物學(xué)常規(guī)診斷方法,對(duì)來(lái)自河南省的152只雞的310份雞腹瀉病料進(jìn)行重要病原菌的分離鑒定。鑒定出124株大腸桿菌,占40％(124/310)；83株疑似雞志賀氏

3、菌,占26.77％(83/310)；62株疑似雞沙門氏菌,占20％(62/310)；41株鏈球菌,占13.23％(41/310)。在分離的四種重要病原菌中,混合感染的比例占48.02％(149/310),單獨(dú)感染的比例為占51.97％(161/310)。并對(duì)所分離的菌株進(jìn)行了致病性試驗(yàn),表明所分離的病原菌大部分都有較強(qiáng)的致病性。
　　 2、對(duì)所分離到的124株大腸桿菌選取94株進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn),表明大腸桿菌的優(yōu)勢(shì)血清型為O14、O

4、157、O74,占定型菌株的57.45％(54/94),其次為O1、O8、O9、O141,占定型菌株的24.46％(23/94)；83株疑似雞志賀氏菌鑒定出18株為雞志賀氏菌,其中優(yōu)勢(shì)血清型為鮑氏型和福氏型,分別占38.89％(7/18)和33.33％(6/18)；62株疑似雞沙門氏菌中14株為雞沙門氏菌,其中雞白痢沙門氏菌占主導(dǎo),比例為64.29％(9/14)；41株雞鏈球菌中,以D血清群禽鏈球菌最多,占73.17％(30/4.1)。

5、
　　 3、通過(guò)紙片擴(kuò)散法,對(duì)分離的病原菌用14種抗生素進(jìn)行藥敏試驗(yàn),結(jié)果表明,四種病原菌的耐藥性都非常嚴(yán)重,均為10～13耐居多,雞大腸桿菌、雞沙門氏菌、雞志賀氏菌、雞鏈球菌分別占35.11％(33/94)、41.18％(14/34)、45.16％(28/62)、73.17％(30/41),且產(chǎn)生嚴(yán)重的交叉耐藥現(xiàn)象,均對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類羅紅霉素的耐藥率最高。除此之外,大腸桿菌主要對(duì)磺胺甲噁唑/甲氧芐啶、頭孢唑啉等耐藥率高；沙門氏菌主

6、要對(duì)喹諾酮類藥物和磺胺甲嗯唑/甲氧芐啶耐藥；志賀氏菌對(duì)喹諾酮類藥物和米諾環(huán)素耐藥嚴(yán)重；鏈球菌對(duì)林可酰胺類和喹諾酮類耐藥性強(qiáng)。
　　 4、PCR檢測(cè)方法的研究中,通過(guò)uid基因建立雞大腸桿菌的PCR檢測(cè)方法,對(duì)分離的124株大腸桿菌進(jìn)行檢測(cè),陽(yáng)性率為90.32％(112/124):通過(guò)invE基因建立雞沙門氏菌的PCR檢測(cè)方法,檢測(cè)14株沙門氏菌,陽(yáng)性率為100％(14/14)；通過(guò)ipaH基因建立雞志賀氏菌的PCR檢測(cè)方法,檢測(cè)