NIBV對(duì)原代雞腎細(xì)胞生長(zhǎng)及相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、為研究NIBV對(duì)雞腎細(xì)胞活性，抗氧化功能以及與細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)量等的影響，探討NIBV的致病機(jī)理。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)已建立的雞腎細(xì)胞體外培養(yǎng)模型，用劑量為半數(shù)組織感染量的NIBV病毒感染雞腎細(xì)胞，檢測(cè)NIBV病毒在腎細(xì)胞內(nèi)的動(dòng)態(tài)復(fù)制變化;通過(guò)MTT四唑鹽法和乳酸脫氫酶測(cè)定試劑盒檢測(cè)NIBV病毒對(duì)腎細(xì)胞活性和細(xì)胞膜的損傷情況，用試劑盒測(cè)定細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶和黃嘌呤氧化酶活性、丙二醛和尿酸含量;SYBR-PCR檢測(cè)原代雞腎細(xì)胞內(nèi)X

2、OD，Bak1，Bcl2，P53，Caspase-3，DDIT3的mRNA相對(duì)基因表達(dá)量變化。結(jié)果表明:感染NIBV后，雞腎細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變化，病毒組細(xì)胞活力極顯著下降(P＜0.01)，細(xì)胞內(nèi)的病毒粒子數(shù)量先升高后下降，在36 hpi達(dá)到最高;與對(duì)照組相比，病毒組細(xì)胞LDH含量、XOD活性、UA濃度、上清液SOD活性和胞內(nèi)MDA濃度均極顯著升高(P＜0.01);胞內(nèi)SOD活性在72 hpi極顯著下降(P＜0.01);熒光定量P