黃芪苷Ⅳ對阿霉素?fù)p傷培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞保護(hù)作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究黃芪苷Ⅳ(astragalosideⅣ，AST)對阿霉素所致培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用，并從乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase，LDH)、線粒體膜電位(mitochondrialmembranepotential，MMP,△ψm)、肌漿網(wǎng)鈣泵(sarcoplasmicreticulumCa2+-ATPases，SERCA)和凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2/Bax四方面探討其作用機(jī)制。 方法：采用體外培養(yǎng)乳

2、鼠心肌細(xì)胞，用阿霉素(adriamycin，ADR)制備心肌細(xì)胞損傷模型。心肌細(xì)胞隨機(jī)分為四組：空白對照組(C組)；ADR組在培養(yǎng)液中加入ADR2mg/L，作用3小時；AST組在培養(yǎng)液中加入AST20mg/L，作用4小時；AST+ADR組為在加入ADR2mg/L前1小時給予AST20mg/L，繼續(xù)作用3小時。然后用比色法測定培養(yǎng)液中LDH活性；pNPP酶法測定心肌細(xì)胞SERCA活力；用羅丹明123(Rhodamine123，Rh123)

3、熒光探針標(biāo)記線粒體，檢測熒光強度，以反映△ψm的變化；Western印跡法檢測心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2/Bax的表達(dá)情況。 結(jié)果：1.LDH活性：與C組比較，ADR組的LDH活性明顯升高(230.2±15.8vs107.8±14.0U/L，P＜0.01)；與ADR組相比，AST+ADR組的LDH活性明顯降低(130.0±25.9vs230.2±15.8U/L，P＜0.01)，與C組比較無顯著性差異；AST組與C組比較無統(tǒng)計

4、學(xué)差異。 2.SERCA活力：與C組比較，ADR組的SERCA活力明顯降低(4.9±1.5vs8.9±2.3μmol·min-1·g-1pro，P＜0.01)；與ADR組相比，AST+ADR組的SERCA活力明顯升高(7.3±1.9vs4.9±1.5μmol·min-1·g-1pro，P＜0.01)，與C組比較無顯著性差異；AST組與C組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。 3.Aψm：與C組比較，ADR組的熒光強度明顯降低(1.4×10

5、5±0.3×105vs3.0×105±0.4×105，P＜0.01)；與ADR組相比，AST+ADR組的熒光強度明顯升高(2.6×105±0.5×105vs1.4×105±0.3×105，P＜0.01)，與C組比較無顯著性差異；AST組與C組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。 4.凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2/Bax：與C組比較，ADR組Bcl-2蛋白表達(dá)量減少(82.7±8.7vs97.5±5.1，P＜0.05)，Bax蛋白表達(dá)量增多(108.3±

6、8.6vs91.3±6.3，P＜0.05)，Bcl-2/Bax比值降低(0.76±0.12vs1.07±0.23，P＜0.05)；與C組比較，AST組Bcl-2蛋白、Bax蛋白表達(dá)量和Bcl-2/Bax比值無明顯變化；與ADR組比較，AST+ADR組Bcl-2蛋白表達(dá)量升高(94.4±5.9vs82.7±8.7，P＜0.05)，Bax蛋白表達(dá)量降低(96.8±4.6vs108.3，P＜0.05)，Bcl-2/Bax比值升高(0.98±0