大鼠局灶性腦缺血N-cadherin mRNA轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)和臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植的研究.pdf

1、第一部分大鼠局灶性腦缺血再灌注N-cadher in mRNA轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)背景和目的急性缺血性腦血管病是一種高發(fā)病率、高致殘率的臨床常見(jiàn)病.越來(lái)越多的證據(jù)已經(jīng)證明患病后機(jī)體發(fā)生了一系列自我修復(fù)過(guò)程.包括神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生、突觸再生,神經(jīng)環(huán)路重建等可塑性變化.N-cadherin作為鈣依賴性細(xì)胞粘附分子亞家族的一個(gè)成員,于個(gè)體發(fā)育階段在控制機(jī)體形態(tài)發(fā)生方面擔(dān)負(fù)著重要的角色.它涉及神經(jīng)元間的粘連、神經(jīng)細(xì)胞的分化、遷移、神經(jīng)突起的外生、軸突成束、

2、組織結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性.它是否也參與了急性缺血性腦血管病發(fā)病后患病機(jī)體的自我修復(fù)尚未見(jiàn)有國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道.該研究的目的是為了觀察大鼠局灶性腦缺血損傷后腦組織神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)N-cadherin mRNA轉(zhuǎn)錄及N-cadherin蛋白表達(dá)水平的變化.方法采用線栓法制作成年SD大鼠大腦中動(dòng)脈供血區(qū)局灶性缺血再灌注模型,采用原位雜交染色及免疫組織化學(xué)染色技術(shù)觀察缺血再灌注后不同時(shí)間點(diǎn)腦組織不同部位神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)N-cadherinmRNA的轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá).第二

3、部分 大鼠局灶性腦缺血后臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植的研究背景與目的干細(xì)胞移植治療腦血管病日益受到人們的重視.干細(xì)胞來(lái)源多取自骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,局部腦內(nèi)注入是主要途徑.考慮骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源有限,反復(fù)多次腦內(nèi)注入移植干細(xì)胞臨床上是病人難以接受的,而臍血間充質(zhì)干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞特征相似,體外培養(yǎng)誘導(dǎo)后可向神經(jīng)細(xì)胞方向分化,因而我們決定以臍血間充質(zhì)干細(xì)胞作為干細(xì)胞來(lái)源,從靜脈途經(jīng)注入,觀察大鼠大腦中動(dòng)脈阻斷后臍血間充質(zhì)干細(xì)胞在腦組織內(nèi)的分布

4、及分化情況.方法通過(guò)線栓法制作成年雄性SD大鼠MCAO模型.模型成功后于缺血再灌后1天、7天從靜脈注入被標(biāo)記好的3×10<'6>個(gè)臍血間充質(zhì)干細(xì)胞.于注射后14、28天將大鼠處死并制作腦組織切片,用熒光顯微鏡觀察腦組織切片上用Dapi標(biāo)記過(guò)的臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的分布;采用免疫組化雙重標(biāo)記染色觀察經(jīng)Brdu標(biāo)記過(guò)的臍血間充質(zhì)干細(xì)胞在腦組織中的分化情況.結(jié)論1、臍血間充質(zhì)干細(xì)胞靜脈注射后能向缺血腦組織中遷移并部分分化成神經(jīng)細(xì)胞.2、靜脈注射臍