不同途徑移植細(xì)胞治療缺血性腦損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、提要目的探討刺五加誘導(dǎo)后的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BoneMarrowStromalCells，BMSCs)不同途徑移植對(duì)大鼠缺血性腦損傷的治療作用的差異。方法貼壁法分離純化骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，經(jīng)Brdu標(biāo)記，用刺五加注射液誘導(dǎo)。采用WIStar雄性大鼠，線栓法復(fù)制大鼠MCAO模型。造模成功后隨機(jī)分為對(duì)照組10只、細(xì)胞尾靜脈移植組10只和細(xì)胞立體定向移植組10只另并假手術(shù)組10只，共4組。細(xì)胞尾靜脈移植組及細(xì)胞立體定向移植組大鼠在造模后72h分別經(jīng)

2、尾靜脈、立體定向途徑移植誘導(dǎo)后骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(3火1擴(kuò)個(gè)只)。觀察大鼠神經(jīng)功能評(píng)分的變化、腦組織形態(tài)學(xué)變化、尼氏體的變化、缺血側(cè)腦組織中腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)表達(dá)水平和BMSCS的存活情況。結(jié)果細(xì)胞尾靜脈移植組和細(xì)胞立體定向移植組大鼠神經(jīng)行為學(xué)、缺血區(qū)皮質(zhì)錐體細(xì)胞結(jié)構(gòu)較對(duì)照組均明顯改善(尸0.05)，缺血區(qū)腦皮質(zhì)BDNF陽(yáng)性表達(dá)水平亦明顯提高(P0.05)，其中細(xì)胞立體定向移植組較細(xì)胞尾靜脈移植組改善更為明顯(尸0.05)，Br

3、du陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量更多(P0.05)。結(jié)論刺五加誘導(dǎo)后的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植能夠有效減輕大鼠局灶性腦缺血損傷所引起的神經(jīng)功能缺損癥狀，其中立體定向途徑移植治療作用優(yōu)于尾靜脈移植。關(guān)鍵詞缺血性腦損傷骨髓基質(zhì)干細(xì)胞:移植:腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子刺五加目錄引言.............…….材料和方法.....................................................……2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物..............

4、......................................……2.2實(shí)驗(yàn)試劑....................................................……2.3實(shí)驗(yàn)儀器....................................................……4.4培養(yǎng)用品的清洗和消毒滅菌....................................……51.4.

5、1玻璃器皿的清洗..........................................……51.4.2橡膠制品的清洗..........................................……51.4.3塑料制品的清洗..........................................……51.4.4培養(yǎng)用品的消毒滅菌(高溫濕熱滅菌法).........……，....……5.5實(shí)驗(yàn)試劑配制...

6、.............................................……61.5.1青霉素、鏈霉素雙抗生素溶液的配制..............……‘...……61.5.2細(xì)胞完全培養(yǎng)液的配制....................................……61.5.30.4%臺(tái)盼蘭溶液的配制..................................……61.5.40.lmgml多聚賴氨酸溶液.

7、...............................……61.5.50.IM磷酸鹽緩沖液(PBS)...............................……61.5.64%多聚甲醛一0.IMPBS固定液..…，...........……，.....……61.5.70.01molL檸檬酸一檸檬酸鈉緩沖液(PH6.0).................……61.5.8蘇木素染液配制[[l..................

8、......................……71.5.9伊紅配制[2j..............................................……71.5.10胰蛋白酶液的配制.......................................……72.實(shí)驗(yàn)方法........................................……2.1培養(yǎng)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞.......……2.1.1大鼠BM