組織因子途徑抑制物-2影響人卵巢癌細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移能力及凋亡的實驗研究.pdf

1、第一部分 人TFPI-2基因表達(dá)載體的擴增及其在人卵巢癌細(xì)胞系中的表達(dá);目的:證實人TFPI-2基因成功轉(zhuǎn)染入人卵巢癌細(xì)胞系A(chǔ)2780,并在其中穩(wěn)定表達(dá).方法:應(yīng)用脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將人TFPI-2基因真核表達(dá)載體pBos-Cite-neo/TFPI-2導(dǎo)入人卵巢癌細(xì)胞系A(chǔ)2780中,采用G418篩選途徑得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的A2780-TFPI-2細(xì)胞,然后通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng),Western blot技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染前后卵巢癌細(xì)胞中TF

2、PI-2 mRNA以及相應(yīng)蛋白質(zhì)表達(dá)水平.結(jié)論:人TFPI-2基因真核表達(dá)載體成功轉(zhuǎn)染人卵巢癌細(xì)胞系A(chǔ)2780,并在細(xì)胞中得到穩(wěn)定表達(dá),為進一步從體外、體內(nèi)兩個層面研究TFPI-2對人卵巢癌細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移能力的影響,以及對細(xì)胞凋亡有無作用提供了扎實的實驗基礎(chǔ).第二部分 TFPI-2影響人卵巢癌細(xì)胞體外遷徙浸潤能力的研究;目的:從功能角度研究TFPI-2對人卵巢癌細(xì)胞體外遷徙浸潤能力的影響.結(jié)論:TFPI-2表達(dá)對人卵巢癌體外自身運動能力無

3、任何影響,但可以顯著抑制人卵巢癌細(xì)胞的體外浸潤能力,為將來卵巢癌的基因治療提供一可能的靶點依據(jù).第三部分 TFPI-2影響人卵巢癌細(xì)胞體內(nèi)浸潤轉(zhuǎn)移能力的研究;目的:建立人卵巢癌細(xì)胞體內(nèi)轉(zhuǎn)移的實驗動物模型,研究TFPI-2對人卵巢癌細(xì)胞體內(nèi)浸潤轉(zhuǎn)移能力的影響.結(jié)論:TFPI-2表達(dá)可以明顯抑制人卵巢癌細(xì)胞的體內(nèi)浸潤能力,有望為探索基因干預(yù)防治腫瘤轉(zhuǎn)移開辟新途徑.第四部分 TFPI-2影響人卵巢癌細(xì)胞凋亡的研究;目的:探討TFPI-2表達(dá)對

4、人卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響.結(jié)論:TFPI-2表達(dá)可以促進人卵巢癌細(xì)胞發(fā)生凋亡,為進一步利用基因治療卵巢癌提供實驗依據(jù).第五部分 卵巢腫瘤中TFPI-2表達(dá)的研究;目的:探討TFPI-2表達(dá)與卵巢腫瘤惡性程度之間的關(guān)系.方法:利用RT-PCR和Western blot技術(shù)測定2例人卵巢惡性腫瘤(卵巢漿液性囊腺癌)、2例人卵巢良性腫瘤(卵巢漿液性囊腺瘤)和2例正常卵巢組織中TFPI-2mRNA和蛋白質(zhì)含量的高低.結(jié)論:TFPI-2表達(dá)與否、含