人胸腺素α1基因及乳鐵蛋白基因在番茄中表達的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究首先根據(jù)植物偏愛密碼子優(yōu)化了人Tα1基因的核苷酸序列，然后人工合成了Tα1基因。由于Tα1基因非常小，為了增加其在植物中的表達量，我們嘗試將它首尾相連形成四聯(lián)體Tα1④，每個單體之間由腸激酶識別位點編碼序列隔開，表達出的四聯(lián)體小肽通過口服進入腸道后會被腸激酶分解成單體小肽而發(fā)揮作用。Tα1基因、Tb1④基因及經(jīng)過密碼子優(yōu)化的lf基因被克隆到雙元載體pBI121中，構(gòu)建了植物表達載體pBI121Tα1、pBI121Tα1④、pBI1

2、21LF。同時我們還根據(jù)已報道的番茄果實成熟過程中受乙烯調(diào)控的果實特異性表達的E8基因啟動子序列設(shè)計了引物，克隆了番茄中蔬5號的E8啟動子，并構(gòu)建了由E8啟動子驅(qū)動lf基因表達的載體pBIE8LF，以及分別由CaMV35S啟動子驅(qū)動Tα1基因和lf基因基因表達的雙價植物表達載體pBITL。構(gòu)建好的植物表達載體利用凍融法轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌菌株LBA4404中，并侵染了番茄子葉外植體，經(jīng)過卡那霉素篩選，最終得到了再生植株67株?！　∞D(zhuǎn)基因番茄中表

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