紅小豆鐵蛋白基因在水稻中的表達(dá)及鐵含量分析.pdf

1、本研究利用實(shí)驗(yàn)室克隆得到的紅小豆鐵蛋白基因的cDNA序列，構(gòu)建不同啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)下的紅小豆鐵蛋白基因編碼序列CDS表達(dá)載體，運(yùn)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法轉(zhuǎn)化水稻品種日本晴，獲得高鐵含量的轉(zhuǎn)基因水稻植株，比較不同啟動(dòng)子的調(diào)控對(duì)鐵蛋白的表達(dá)和鐵含量的影響差異。為培育含鐵量高的轉(zhuǎn)基因水稻，提高水稻的營養(yǎng)品質(zhì)，解決人類的鐵缺乏癥提供一條方便、經(jīng)濟(jì)、有效的途徑。主要研究結(jié)果如下： 1．采用RT-PCR得到紅小豆鐵結(jié)合蛋白編碼序列CDS，構(gòu)建不同

2、啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)下的紅小豆鐵蛋白基因表達(dá)載體，啟動(dòng)子分別為水稻種子谷蛋白基因啟動(dòng)子GluB-1，玉米泛素啟動(dòng)子Ubi-1，水稻肌動(dòng)蛋白Actin啟動(dòng)子。 2．從紅小豆中分離出鐵蛋白的基因組序列，全長(zhǎng)2.3kb，含7個(gè)內(nèi)含子。同時(shí)構(gòu)建了水稻種子特異表達(dá)啟動(dòng)子GluB-1和組成型啟動(dòng)子Ubi-1的全長(zhǎng)基因表達(dá)載體。 3．運(yùn)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法和基因槍法轉(zhuǎn)化水稻品種日本晴，得到轉(zhuǎn)基因植株。 4．對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PCR和Sout