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文檔簡介
1、目的:柯薩奇病毒是人類重要的病原體,可引起心肌炎、心包炎等疾病,嚴重危害人類健康??箍滤_奇病毒治療可有效改善病毒性心肌炎臨床癥狀,延緩病程,中藥黃芪抗柯薩奇病毒療效明確,本試驗以黃芪作為陽性對照藥物,探討苦參粗提物對柯薩奇病毒急性及持續(xù)性感染的抑制效果及可能的作用機制。 方法和結果: 1.建立CVB3持續(xù)感染細胞模型:以10<'-4>TCID50 CVB3感染ECV304細胞,建立CVB3持續(xù)感染細胞模型,觀察持續(xù)感染細
2、胞模型培養(yǎng)上清液對Vero細胞的CPE和RT-PCR法檢測上清中的CVB3核酸。 結果:持續(xù)感染模型細胞培養(yǎng)上清液可使Vero細胞產生明顯CPE,并含有少量病毒核酸,表明CVB3持續(xù)感染細胞模型建立成功。 2.以100TCID50 CVB3病毒液為感染濃度,苦參藥液濃度為4mg/ml、2mg/ml和1mg/ml,按苦參對CVB3的作用方式分為三組:預防組、直接作用組和感染后給藥組,進行苦參對CVB3急性感染抑制作用的研究
3、,MTT法檢測苦參對CVB3的抑制作用;用原位ELISA、細胞保護試驗、RT-PCR和TNF-α檢測,判斷苦參對CVB3持續(xù)感染的抑制作用。 結果:在藥物對病毒的預防作用組中,苦參不能預防CVB3感染,CVB3對ECV304細胞CPE未明顯減輕;在藥物和病毒直接作用組及感染病毒后給藥組中,ECV304細胞病變明顯減輕,呈劑量依賴性,隨苦參濃度的增高,藥物對CVB3的抑制率增高:在苦參對CVB3持續(xù)感染作用組中,與模型對照組相比,
4、苦參作用后培養(yǎng)上清液致Vero細胞病變明顯減輕, CVB3核酸復制減少、TNF-α含量降低,原位ELISA顯示細胞表面CVB3抗原表達減少。與陽性藥物黃芪比較,兩種藥物作用效果相似,差異無統(tǒng)計學意義。 結論: 1.本研究重復本室已建方法再建CVB3持續(xù)感染細胞模型成功,為體外抗病毒研究提供可靠的工具; 2.以黃芪為陽性對照藥物,探討苦參對CVB3感染的抑制作用,發(fā)現①苦參能有效抑制CVB3對ECV304細胞的急性
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