乳腺導管內增生性病變及浸潤性乳腺癌中ERβ蛋白表達及其基因甲基化的研究.pdf

1、[目的]:觀察乳腺普通型導管增生(usual ductal hyperplasia，uDH)、非典型導管增生(atypical ductal hyperplasia，ADH)、導管原位癌(ductal carcinoma in situ，DCIS)及浸潤性乳腺癌(invasive breast cainoma，IBC)中雌激素受體β(estrogen receptor beta，ER β)基因啟動子甲基化的變化及ERβ蛋白的表達，分析E

2、Rβ基因甲基化與ERβ蛋白表達之間，ERβ與ERα之間的相關性，旨在探討ERβ在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程的作用，以期為臨床指導乳腺癌內分泌治療提供實驗依據。 [方法]:選擇齊魯醫(yī)院2002～2005年外科手術切除標本64例，其中乳腺導管內增生性病變44例(UDH 12例，ADH 8例，DCIS 24例)，浸潤性乳腺癌14例，正常乳腺組織6例(來自乳腺整形手術)。所選標本均經10﹪福爾馬林固定，石蠟包埋。根據2003年WHO乳腺腫瘤病

3、理診斷標準對所選病例的HE組織切片進行復習以確定診斷。從全部病例的石蠟包埋組織中提取DNA進行甲基化特異性PCR(methylation-specific PCR，MSP)檢測，對其中57例組織切片采用二步法進行ERβ的免疫組織化學染色。用SPSS軟件對所得數據進行統(tǒng)計分析。 [結果]:在12例UDH中，7例檢測到甲基化，甲基化率為58.3﹪；8例ADH中，5例檢測到甲基化，甲基化率為62.5﹪；24例DCIS中，15例檢測到甲

4、基化，甲基化率為62.5﹪；14例.IBC中，11例檢測到甲基化，甲基化率為78.6﹪，6例正常乳腺組織中均未檢測到ERβ甲基化。經統(tǒng)計學分析，正常乳腺組織和UDH、ADH、DCIS及IBC之間ERβ基因甲基化率有顯著性差異；其余各組之間ERβ基因甲基化率無顯著性差異。從正常乳腺組織到導管內增生性病變再到浸潤性癌的發(fā)展過程中ERβ基因甲基化率呈增高趨勢，經線性趨勢檢驗有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 免疫組化染色結果顯示，ERβ蛋

5、白陽性例數百分率：6例正常乳腺組織全部陽性，陽性率為100﹪(6/6)；UDH為81.8﹪(9/11)；ADH為42.9﹪(3/7)；DCIS為45.5﹪(10/22)；IBC為27.3﹪(3/11)。ERβ蛋白陽性細胞表達率：正常乳腺組織中為86.4﹪，UDH為64.3﹪，ADH為25.0﹪，：DCIS為27.2﹪，而在浸潤性癌中為9.3﹪，從正常乳腺組織到導管內增生性病變再到浸潤性癌的發(fā)展過程中ERβ蛋白的陽性例數百分率和陽性細胞表

6、達率都呈下降趨勢，且這種變化趨勢具有統(tǒng)計學意義。在31例ERB陽性的病例中，14例檢測到甲基化，甲基化率為45.2﹪；在26例ERB陰性的病例中，20例檢測到甲基化，甲基化率為76.9﹪。經統(tǒng)計學分析ERB陽性組和ERβ陰性組之間，ERβ基因甲基化率有顯著性差異(P<0.05)。統(tǒng)計分析結果提示，ERβ蛋白表達與ER β基因甲基化兩者之間呈負相關。 結合以往我們的實驗結果，經配對統(tǒng)計分析提示，ER β蛋白表達與ER Q蛋白表達不

7、具有相關性，ER β甲基化與ERα甲基化之間也不具有相關性(P>0.05)。 [結論]:1．ERβ基因啟動子在正常乳腺組織中未發(fā)生甲基化，而在乳腺癌變中出現甲基化，但尚有少部分乳腺癌的ERβ基因未發(fā)生甲基化。2．在乳腺導管內增生性病變中，：ER β基因甲基化已經存在，表明ERβ基因甲基化可能是癌變發(fā)生的早期事件。3．從正常乳腺組織到普通型導管增生、非典型導管增生、導管內原位癌直到浸潤性乳腺癌的發(fā)展過程中，ERβ基因的甲基化率呈逐

8、漸上升趨勢，而ER B蛋白表達呈下降趨勢，這提示隨著癌變的發(fā)展過程，ER β基因的甲基化逐漸增加，ERβ蛋白表達逐漸喪失。4．從正常乳腺組織到增生性病變再到浸潤性乳腺癌的發(fā)展過程中ERβ蛋白的失表達與ERβ基因甲基化有一定的關系，啟動子的甲基化很可能是ERβ基因沉默的方式之一。5．ERβ的基因甲基化及蛋白表達與ERα基因甲基化及蛋白表達之間無明顯關系，表明ERβ的作用不依賴于ERα的存在，提示ERβ蛋白在乳腺癌內分泌治療中的作用可能與E