豬口蹄疫病毒O-GS-WW-92株經(jīng)不同宿主連續(xù)傳代后3A基因的變異研究.pdf

1、甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬口蹄疫病毒O/GS/WW/92株經(jīng)不同宿主連續(xù)傳代后3A基因的變異研究姓名：吳錦艷申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：劉湘濤;胡永浩20050601S t u d y o n V a r i a t i o n o f 3 A G e n e F r o m t h eO ／G S ／W ' W ／9 2S t r a i no fS w i n e F o o t —a n d —M o u

2、t h D i s e a s e V i r u s P r o p a g a t e ds u c c e s s i o n a l l yi nd i 航r e n t H o s t C e l l sa n d A n i m a l sS u m m a r yF M D V d e r i v e df r o md i f f e r e n th o s ta n i m a l s ．i t s3 A p r o

3、 t e i n i sd i f f e r e n t ．C o m p a r e dw i t hb o v i n eF M D V s w i n eF M D V n o n s t r u e t u r a lp r o t e i n3 A w 髂a l t e r e d1 0a m i n o a c i d si n9 3 ．1 0 2s i t e s ，I nt h i sL a b ．i tw a sf

4、i n dt h a tO ／G S ／W W 侈2s t r a i n 3 Aa l t e r e d4a m i n o a c i d si na m i n o a c i d ss e q u e n c e9 3 —1 0 2s i t e s ，m e a n w h i l et h ev i r u sh a sa p p a r e n tt e n d e n t i o u s n e s si nt r o

5、 p i s mt os w i n ea n db o v i n e ．I tr e p o r t e dt h a tt h eo r i g i no fp o r c i n eF M D V W a sf r o mO M I Iv a c c i n e s t r a i n ．H o w e v e r , t h i sr e s u l tw a s j u s tf r o mt h ea n a l y s

6、i so fV P ln u c l e o t i d es e q u e n c e s ，t h e r ei s n oe x p e r i m e n t m o d e l a b o u t 3 A t os u p p o r t t h i st h e o r y d i r e c t l y ．A n a l y z i n g t h e h o m o g e n e i t y b e t w e e

7、n O ／G S ／W W ／9 2 a n d O M I I , w e f i n dt h e y h a v e a c l o s eg e n e t i c sr e l a t i o n s h i pa n d t h eh o m o g e n e i t y o f V P l a n d 3 A a r e9 7 ．7 ％a n d9 8 ．9 ％r e s p e c t i v e l y ,t h e

8、p r o t e i n3 A o f O ／G S ／W W ／9 2 s t r a i ns u c c e s s i o n a l l yd e l e t e d 4 a m i n o a c i d s i n9 3 —1 0 2 s i t e s ．S o w e c o n j e c t u r e i ti Sp o s s i b l e t h a tt h eO ／G S ／W W ／9 2 d e

9、r i r e d f r o m 0 M I I ．T h e r e f o r e ．w es e l e c t e dO ／G S ／W W ／9 2a s t h es a m p l e ，p a s s a g e d i nd i f f e r e n t h o s t c e l l sa n d a n i m a l ，t op r e v i e wt h eg e n e t i c r e l a t

10、i o nb e t w e e n 0 ／G S ／W W ，9 2 a n d O M I I u n d e r t h eL a b c o n d i t i o n ．T h er e s u l t ss h o w e dt h a t ：nO ／G S ／W W ／9 2w e r ep a s s , a g e db yd i f f e r e n th o s t s ( p a s s a g e d1 1

11、0g e n e r a t i o n si nB H K - 2 1c e l l ，6 5g e n e r a t i o n si nP K - 1 5c e l l ，9g e n e r a t i o n si ns w i n e ) ，3 Ap r o t e i nd i d n ’ta l t e rs i m i l a r i t yt on a t u r a l l y ．2 ) O ／G S ／W W

12、／9 2g r e w w e l li nB H K ·2 1a n dP K - 1 5c e l l s ，b u tr e p l i c a t e d p o o r l y i nM D - B K c e l l ．3 ) w i t l l t h ei n c r e a s eo f p a s s a g e d g e n e r a t i o n s ，L D s 0a n d T C I D s

13、 0 a l s or i s e ．4 ) N u c l e o t i d es e q u e n c eo f V P l g e n e t a k ep l a c e a S e r i e so f s u b a i m t i o n ．T h u s i t C a nb es e e n ，F(xiàn) M D V a l t e r e d4a m i n oa c i d sw e r ea d d i c t e

14、ds t r o n g l yt os w i n e ，b u tw e r e a t t e n u a t e dt ob o v i n e ．o ／0 S ，W Ⅵr ，9 2W a s l i k e l yt oa n t r a n s i t i o ns t r a i nf r o m b o v i n ev i r u s t os w i n ev i r u s ，F(xiàn) M D V m a j o r i

15、 m m u n o l o g i c a lg e n eV P lm u t a t e d r a n d o m l ya n d n o —d i r e c t i o n a l l y ,b u t g e n e r a l l y t h i sm u t a t i o n w i l lk e e p s t a b i l i z a t i o n t oa n t i g e n i c i 夠K e y