大鼠腎臟缺血預(yù)適應(yīng)現(xiàn)象的證實(shí)及其機(jī)制研究.pdf

1、[目的]研究NF-κB和ICAM-1的基因表達(dá)在腎臟缺血預(yù)適應(yīng)中的作用,結(jié)合血肌酐水平、腎組織病理學(xué)變化、腎小管損傷積分、腎臟氧化應(yīng)激情況和腎內(nèi)中性粒細(xì)胞(PMN)浸潤(rùn)程度,從組織到分子水平初步探討缺血預(yù)適應(yīng)對(duì)于急性缺血性腎損傷是否具有保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制,為臨床防治急性腎衰竭提供新的思路.研究分兩個(gè)部分,第一部分首先證實(shí)腎臟缺血預(yù)適應(yīng)現(xiàn)象的存在;第二部分研究腎臟缺血預(yù)適應(yīng)的機(jī)制,重點(diǎn)是中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)和NF-κB在腎臟缺血預(yù)適應(yīng)中

2、的作用.[方法]建立大鼠腎臟缺血預(yù)適應(yīng)模型.第一部分雄性Wistar大鼠30只,摘除右腎,隨機(jī)分成4組:假手術(shù)組(sham組):只分離左腎動(dòng)脈,空置75分鐘;單純預(yù)缺血組(IPC組),且動(dòng)脈夾夾閉左腎動(dòng)脈2分鐘,松開5分鐘,反復(fù)4次,再空置45分鐘;單純?nèi)毖M(I/R組),空置30分鐘后,持續(xù)夾閉左腎動(dòng)脈45分鐘;缺血預(yù)適應(yīng)-缺血組(IPC-I/R組),左腎動(dòng)脈夾閉2分鐘,松開5分鐘,反復(fù)4次后直接夾閉45分鐘,然后恢復(fù)左腎灌注24小時(shí)

3、.第二部分雄性Wistar大鼠82只,全部摘除右腎,隨機(jī)分成11組:A1、B1、C1、D1組分別同第一部分的Sham、IPC、I/R、IPC-I/R組;A2、B2、C2、D2組分別同A1、B1、C1、D1組,但處理后恢復(fù)灌注2小時(shí);B3、C3、D3分別同B2、C1、D1,但處理前30min腹腔注射吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽(PDTC,抗氧化劑,能抑制NF-κB的活化)150mg/kg.所有大鼠采血和取得腎組織后處死.檢測(cè)血肌酐水平、腎組織M

4、PO活性或SOD活力,評(píng)價(jià)腎組織病理學(xué)變化.用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)腎組織ICAM-1mRNA表達(dá),EMSA方法檢測(cè)腎組織NF-κB的DNA結(jié)合活性變化.[結(jié)論]①成功建立了大鼠的腎臟缺血預(yù)適應(yīng)模型.②腎臟缺血預(yù)適應(yīng)使急性缺血后大鼠血肌酐上升幅度明顯減少,組織學(xué)損傷明顯減輕,小管損傷積分顯著減少,因此對(duì)腎功能有一下的保護(hù)作用.③腎臟缺血預(yù)適應(yīng)可心減輕急性缺血性腎損傷,其可能的機(jī)制與其減少缺血時(shí)PMN在腎臟聚集密切相關(guān).④腎臟缺血預(yù)適應(yīng)減少

5、缺血時(shí)PMN在腎臟聚集,可能通過(guò)抑制腎臟急性缺血時(shí)粘附分子ICAM-1mRNA表達(dá)上調(diào)來(lái)實(shí)現(xiàn)的.⑤在缺血預(yù)適應(yīng)對(duì)急性缺血時(shí)腎損傷的保護(hù)中,NF-κB的活化有重要作用.預(yù)缺血對(duì)NF-κB的激活抑制了急性缺血時(shí)腎臟NF-κB的活化,并可能通過(guò)進(jìn)一步減少ICAM-1的表達(dá)而減輕缺血性腎損傷;預(yù)缺血對(duì)NF-κB的活化可能與預(yù)缺血使腎組織的SOD活力增加有關(guān);PDTC抑制了預(yù)缺血對(duì)NF-κB的激活作用,并使預(yù)缺血對(duì)急性腎缺血的保護(hù)作用消失,而PD