14971.zbtb互作蛋白篩選、鑒定

1、碩士學位論文論文題目ZBTB互作蛋白篩選、鑒定研究生姓名趙艷霞指導教師姓名王尉平專業(yè)名稱生物化學與分子生物學研究方向功能基因組學論文提交日期2013年4月ZBTB互作蛋白篩選、鑒定中文摘要I中文摘要蛋白質(zhì)間的相互作用存在于機體每個細胞的生命活動過程中，它們控制著大量的細胞活性事件，是生命活動的基礎，因此對生命活動過程中的蛋白質(zhì)相互作的研究有助于揭示生命過程的許多本質(zhì)問題。而在當前蛋白質(zhì)互作研究方法中，酵母雙雜交系統(tǒng)因其檢測的是真核酵母細

2、胞內(nèi)的相互作用而被廣泛應用。ZBTB蛋白家族是真核生物中普遍存在的轉(zhuǎn)錄因子，具有C2H2Kppel鋅指基序和BTBPOZ結構域，在細胞增殖、分化、凋亡和功能調(diào)節(jié)等生物學過程中發(fā)揮著重要作用。本課題前期已根據(jù)數(shù)據(jù)庫序列信息通過RTPCR技術克隆得到ZBTB家族成員ZBTB8A、ZBTB6，并對ZBTB8A、ZBTB6進行了初步探究。本課題利用酵母雙雜交技術在人胎腦文庫中篩選與ZBTB8A互作的蛋白共篩選得到34種與之互作的新蛋白，并通過哺

3、乳動物細胞pulldown實驗對其中一種蛋白質(zhì)XPA與ZBTB8A的相互作用進行了進一步的驗證。同時，我們還利用酵母雙雜交技術在人胎腦文庫中，對ZBTB6互作蛋白進行了初步篩選，本課題成功構建了釣餌質(zhì)粒pGBKT7ZBTB6，并通過了毒性和自激活檢測；完成了胎腦文庫的擴增；通過酵母雙雜交技術SDTrpLeuHisAdeXαGal平板初步篩選得到186例陽性克隆，為后續(xù)研究奠定了基礎。關鍵詞：ZBTB8A；ZBTB6；酵母雙雜交；哺乳動物