水稻OsVDAC5互作蛋白篩選及其基因RNA干涉.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、電壓依賴性陰離子通道(voltage-dependent anion channels,VDACs)，主要定位于線粒體外膜上的孔狀蛋白。VDACs能同其它線粒體外膜上的蛋白形成復合體，在胞質(zhì)和線粒體之間進行代謝物質(zhì)的轉(zhuǎn)運。本實驗室前期鑒定了8個VDAC水稻基因，但大多數(shù)的功能尚未報道。本研究擬利用膜蛋白酵母雙雜交技術(shù)篩選OsVDAC5互作蛋白，并通過超表達和干涉OsVDAC5基因，初步鑒定其生物學功能。取得如下進展：
　　1、生物

2、信息學方法預(yù)測了OsVDAC5可能是一個十二次或十八次跨膜蛋白，N端和C端有可能均位于線粒體，由此構(gòu)建了7種OsVDAC5部分缺失的誘餌蛋白載體進行互作鑒定。酵母雙雜交實驗結(jié)果顯示僅保留OsVDAC5蛋白75個氨基酸殘基的誘餌蛋白載體可用于互作蛋白的篩選，并從水稻YTB幼穗cDNA文庫中篩選到7個可能的互作蛋白，但互作真實性還需進一步驗證。
　　2、將基因OsVDAC5部分特異cDNA序列克隆到干涉載體pMCG161，遺傳轉(zhuǎn)化水稻

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