1772.基于識(shí)別引發(fā)dna構(gòu)型變化的比例電化學(xué)檢測(cè)新方法研究

1、分類號(hào)0657.1單位代碼10447密級(jí)無(wú)學(xué)號(hào)1410120213碩士學(xué)位論文基于識(shí)別引發(fā)基于識(shí)別引發(fā)DNADNA構(gòu)型變化的比例構(gòu)型變化的比例電化學(xué)檢測(cè)新方法研究電化學(xué)檢測(cè)新方法研究StudyonNovelMethodsBasedonTargetInducedRatiometricElectrochemicalDetection作者姓名王蘭蘭王蘭蘭專業(yè)名稱分析化學(xué)分析化學(xué)指導(dǎo)教師姓名王懷生王懷生教授教授學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院論文提

2、交日期20172017年6月聊城大學(xué)碩士學(xué)位論文i摘要伴隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，蛋白質(zhì)、DNA以及金屬離子等生命相關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)在臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全等領(lǐng)域的應(yīng)用日益廣泛，而傳統(tǒng)的檢測(cè)方法往往靈敏度較低，因此，發(fā)展更多的新技術(shù)和新方法對(duì)于實(shí)現(xiàn)目標(biāo)分析物的快速高靈敏檢測(cè)至關(guān)重要。本論文將適配體的特異性識(shí)別、金屬DNA酶的親合作用、酶輔助循環(huán)放大及生物條形碼納米探針?lè)糯笈c傳統(tǒng)電分析方法相結(jié)合，引入“一對(duì)雙”的信號(hào)輸出模式，發(fā)展了一系列新型

3、比例電化學(xué)傳感器，用于核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子以及鉛離子的靈敏檢測(cè)，有效克服了傳統(tǒng)單信號(hào)電化學(xué)傳感器“假陽(yáng)性”或“假陰性”的缺點(diǎn)，大大提高了分析檢測(cè)的特異性及重復(fù)性。主要包括以下三個(gè)部分：1、基于靶誘導(dǎo)耦合生物條形碼納米放大技術(shù)的凝血酶比例電化學(xué)傳感器、基于靶誘導(dǎo)耦合生物條形碼納米放大技術(shù)的凝血酶比例電化學(xué)傳感器基于“信號(hào)擴(kuò)增”和“信號(hào)衰減”同時(shí)發(fā)生策略，構(gòu)建了用于凝血酶靈敏檢測(cè)的新型比例電化學(xué)適體傳感器，通過(guò)二茂鐵標(biāo)記的發(fā)卡探針（Fc

4、HP）、凝血酶適配體、亞甲基藍(lán)標(biāo)記的生物條形碼納米金（MBP3AuNPs）層層自組裝實(shí)現(xiàn)傳感平臺(tái)的構(gòu)建。該方法結(jié)合了適配體識(shí)別特性、生物條形碼納米探針擴(kuò)增能力及雙信號(hào)同時(shí)輸出策略，實(shí)現(xiàn)了凝血酶的靈敏檢測(cè)，其檢測(cè)范圍為0.00330nM，檢出限低至1.1pM(SN=3)，并且具有良好的選擇性，穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。另外，本實(shí)驗(yàn)也為建立一種普適性的比例電化學(xué)分析方法提供了新的思路，如果改變識(shí)別探針，可將該傳感器用于其它目標(biāo)分子的檢測(cè)，該傳感器有望

5、應(yīng)用于疾病診斷、生物分析領(lǐng)域。2、基于特異性、基于特異性DNA酶檢測(cè)酶檢測(cè)Pb2的比例電化學(xué)傳感器的比例電化學(xué)傳感器基于特異性DNA酶構(gòu)建了靈敏的Pb2比例電化學(xué)傳感器。該傳感器主要利用“817”DNA酶的高特異性和選擇性，它能夠特異性的識(shí)別Pb2，通過(guò)在電極表面雜交具有Pb2識(shí)別位點(diǎn)的亞甲基藍(lán)標(biāo)記探針（MBP1）及二茂鐵標(biāo)記探針（FcP2）實(shí)現(xiàn)傳感平臺(tái)的構(gòu)建。Pb2的出現(xiàn)會(huì)激活DNA酶并催化裂解底物鏈，進(jìn)而引發(fā)電極表面的DNA構(gòu)象發(fā)生