草莓花芽形成和果實發(fā)育過程中IAA及ABP1的免疫化學(xué)分析.pdf

1、以草莓(Fragaria ananasssa. Duch.)為試材,采用免疫組織化學(xué)分析的方法,利用Indole-3-acetic acid(IAA)的單克隆抗體和生長素結(jié)合蛋白1(ABP1)的多克隆抗體,首次對花芽形成和果實發(fā)育過程中,草莓莖尖、花托和瘦果中的內(nèi)源IAA以及ABP1的分布及動態(tài)變化進(jìn)行了原位分析;結(jié)合IAA極性運輸抑制劑——萘基酞氨酸(NPA)對花芽孕育期間的草莓莖尖的處理;并利用膠體金免疫電鏡定位的方法,對這些過程中

2、草莓莖尖分生組織和分化中的花器官原基,以及花托維管組織中IAA和ABP1的亞細(xì)胞分布進(jìn)行分析,結(jié)果表明:在花芽孕育時期,IAA及ABP1越來越集中分布于花芽孕育的關(guān)鍵部位——莖尖分生組織(SAM).花芽分化整個過程中,莖尖內(nèi)都有IAA和ABP1的明顯分布,該過程中IAA與ABP1的分布部位基本相同,隨著花芽分化進(jìn)程的推進(jìn),兩者總是分布于分化發(fā)育最旺盛的花芽分生組織以及各個花器官原基部位.利用IAA的極性運輸抑制劑NPA對花芽孕育過程中的

3、草莓莖尖進(jìn)行處理,觀察了草莓花芽分化的進(jìn)程,對莖尖組織中IAA進(jìn)行定量、定位分析.結(jié)果表明,該時期用NPA處理草莓莖尖,可以抑制SAM部位IAA含量的增加,并引起花芽分化進(jìn)程的延遲和花芽發(fā)育的異常.分析認(rèn)為,草莓莖尖中的IAA可能主要由幼葉及葉原基產(chǎn)生,并通過葉片以及莖尖的維管系統(tǒng)運向ASM及其它相關(guān)部位.SAM部位一定水平的IAA以及在正常功能的IAA運輸體系,不僅是草莓成花轉(zhuǎn)變所必需,也是維持花芽分化正常進(jìn)行所必需的.果實發(fā)育過程中

4、,從綠熟后期到轉(zhuǎn)色期,花托維管組織內(nèi)都有特異的IAA及ABP1信號存在.其中,IAA信號以白熟前期和轉(zhuǎn)色期明顯較強(qiáng),并主要分布于韌皮部;ABP1信號一直較強(qiáng),而且,在白熟中期以后,除韌皮部以外,木質(zhì)部中也出現(xiàn)ABP1信號,并有逐漸加強(qiáng)的趨勢.瘦果中,從綠熟后期到白熟后期IAA信號逐漸增強(qiáng),IAA信號主要分布于發(fā)育著的胚中,轉(zhuǎn)色期以后瘦果中基本上檢測不到IAA信號.從綠熟期到轉(zhuǎn)色期瘦果內(nèi)一直有很強(qiáng)的ABP1信號存在,信號主要分布在發(fā)育著胚

5、及胚周圍組織中.亞細(xì)胞定位結(jié)果表明,花芽形成的整個過程中莖尖分生組織(SAM)和花器官原基部位的細(xì)胞中都有IAA和ABP1的明顯分布,并且兩者在分布位置上非常相似,都主要分布在質(zhì)膜(PM)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)、細(xì)胞壁(CW)、核(N)、液泡膜(VM)等部位.其中在質(zhì)膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的信號最突出.果實發(fā)育的白熟期與轉(zhuǎn)色期,花托維管組織的細(xì)胞中都存在較強(qiáng)的IAA與ABP1信號,兩者存在部位也非常相似,都主要分布在篩管分子的細(xì)胞壁、質(zhì)膜,以及伴胞的細(xì)