利用CYP86MF反義基因轉(zhuǎn)化創(chuàng)建青花菜與芥藍(lán)雄性不育植株的研究.pdf

1、蕓薹屬(Brassica)植物是雜種優(yōu)勢(shì)利用最為普遍的一類作物,其雄性不育的機(jī)理以及雄性不育系選育的研究一直深受研究人員的重視.我們前一階段利用mRNA差異顯示技術(shù)從白菜(B.campestris L.ssp.chinensis(L.)Makino var.communis Tsen et Lee)核雄性不育兩用系中分離得到了一個(gè)與白菜核雄性不育相關(guān)的編碼細(xì)胞色素P450基因CYP86MF.采用反義技術(shù)將可育株高表達(dá)的CYP86MF基因

2、中約460 bp的片段導(dǎo)入正?？捎撞撕筒诵?B.campestris ssp.chinensis var.parachinensis(Bailey)Tsen et Lee)中,得到了130多株轉(zhuǎn)化雄性不育植株.為進(jìn)一步了解該實(shí)驗(yàn)室獲得的CYP86MF基因在蕓薹屬其它作物上的生物學(xué)功能,在建立了青花菜和芥藍(lán)的高效再生體系的基礎(chǔ)上,我們將上述反義片段導(dǎo)入正常可育的青花菜(B.oleracea L. var.italica P.)和芥藍(lán)(B

3、.oleraceavar.alboglabra)中,得到了260多株轉(zhuǎn)化植株.轉(zhuǎn)基因青花菜雄蕊表現(xiàn)出明顯的褐化現(xiàn)象,花粉少,轉(zhuǎn)基因芥藍(lán)花器官則沒有明顯的特征,只是相對(duì)于對(duì)照植株而言,花絲略微短小.轉(zhuǎn)基因植株的花粉均不能正常萌發(fā).我們分析了轉(zhuǎn)基因不育植株與正?？捎仓闏YP86MF基因的表達(dá)特征,對(duì)轉(zhuǎn)基因植株及其對(duì)照株之間的小孢子的形態(tài)進(jìn)行了觀察,比較了它們之間蛋白質(zhì)表達(dá)的差異,從而為探討CYP86MF基因在蕓薹屬植物小孢子發(fā)育過程中的作