豬瘟病毒SM株單克隆抗體的制備、初步鑒定及應(yīng)用研究.pdf

1、該研究采用單克隆抗體技術(shù),用純化的豬瘟病毒石門毒株(CSFV-SM)免疫BALB/C小鼠,取免疫鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞SP2/0進(jìn)行細(xì)胞融合,經(jīng)篩選克隆后,獲得了10株能夠穩(wěn)定分泌抗CSFV的單克隆抗體(Monoclonal antibody,McAb)的雜交瘤細(xì)胞株,分別命名為2F<,4>、2F<,7>、2E<,10>、2B<,2>、4G<,5>H<,2>、5F<,11>、5C<,9>B<,1>、4A<,1>C<,9>、3C<,4>、5

2、H<,11>.間接ELISA測定雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清和接種小鼠腹腔制備的腹水McAb效價,分別在1:160~1:640之間和1:800~1:6400之間;在-80℃超低溫下保存3個月后復(fù)蘇的各雜交瘤細(xì)胞仍然能穩(wěn)定分泌抗CSFV的McAb.免疫熒光(IF)試驗對McAb的特異性檢測結(jié)果表明,2F<,7>、2E<,10>、2B<,2>、4G<,5>H<,2>、5F<,11>、5C<,9>B<,1>、4A<,1>C<,9>與接種CSFV-SM毒

3、的細(xì)胞能產(chǎn)生特異熒光,尤以4G<,5>H<,2>株最強,效價高達(dá)1:1000;McAb與CSFV E2蛋白反應(yīng)結(jié)果表明,2E<,10>、2B<,2>、4G<,5>H<,2>、2F<,7>是抗E2蛋白的McAb.McAb與SDS處理前后的CSFV-SM抗原均有反應(yīng),推測McAb針對的抗原表位可能是線性表位.利用4G<,5>H<,2> McAb對接種CSFV-SM株、梧州株、博白株、北海株和疫苗株病毒的PK<,15>細(xì)胞進(jìn)行免疫酶試驗,結(jié)果