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文檔簡介
1、浙江理工大學碩士學位論文里氏木霉swollenin在米曲霉中的表達和純化姓名:王美花申請學位級別:碩士專業(yè):生物化學與分子生物學指導教師:徐志南張耀洲20091201浙江理工大學碩士學位論文AbStractTheswolleninproteinissimilartoplantexpansinitCallactoncellulosematerialsandcauseloosestructure,promotecellulasetodeco
2、positoncellulosedespitethelackofhydrolyticactivityitselfTheproteinwasnamedswolleninandthegeneWasnamedswolduetoitsabilitytoswellcottonfibersCelluloseisthemostabundantformsofcarbohydrateinnatureandrepresentspotentialfeedst
3、ocksfortheproductionofchemicalstoreplacepetroleumOnacommercialscale,theconversionofcellulosicbiomassrequirestheuseofcellulasethatmakestheprocessmorecostlyAccordingly,theactivityofswolleninandplantexpansinisveryhelpfultoc
4、ellulosedecompositionbycellulasedespitethelackofhydrolyticactivitythemselvesHowever,itisdifficulttoexpressplantexpansininotherspieces,onlypurificationcailnotmeettheindustrialneedswolleninhavealladvantageinthatitcanbeexpr
5、essedheterologouslyinadifferentmicroorganismho甌andthustheexpressionlevelCanbeimprovedthroughmicroorganismfermentationMostofthepreviousworksonswolleninmainlyfocusedontheinvestigationofswolleninactivity,littleinformationab
6、outtheeffectsofmediumcompositionandexpressionconditionsontheproductivityofswolleninproteinisavailableTheswolgeneencodesapolypeptideof493aminoacidresidues,thebioinformaticssoftwareanalysisresultindicatesthatthepredictedmo
7、lecularweightandpIoftheproteinWas515kDand48,respectivelyTheswolleninproteinhasthreemainlydomainasfollows:cellulosebindingdomainexpansinEG45domainandexpansinCBDThesecondarystructureofswolleninismainlypsheetandrandoncoil,e
8、speciallythestructureofCBDisthemostloosyWesuccessfullyexpressedtheswolleninproteininrecombinantAspergillusoryzae,withregardtotheswolleninbioactiV咄investigationsontheeffectsofculturecompisiton(such嬲carbonsourceandnitrogen
9、source)andcultureconditionsdevelopmentwerepresentedhereTheoptimalconditionsweredeterminedasfollows:cultivationinthemedium、衍mglycerinandpeanutasthecarbonandnitrogenSOurCe,respectively,塒也the15107sporesin40mLculture,atpH56,
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