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1、華東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文不同蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)域的轉(zhuǎn)導(dǎo)功能初步研究姓名：肖偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：趙健20091230ThePreliminaryStudyonTransductionofDifferentProteinTransductionDomainsAbstractProteintransductiondomain(PTD)，ashortpeptidecarryingotherbiomacromolecul
2、esintocell，isapotentiallynovelandeffectivealderfordiseasetherapyandstudywiththehelpofEGFPandApoptin，weconstructedfiverecombinantplasmids，andthenthefivefusionproteinswereexpressedandpurifiedthepmliminarystudytransductionW
3、asdoneonthethreefusionproteins、析n1EGFPandthepreliminarypharmacologicalactivitystudyWasdoneonthetwofusionproteinswitllApoptintoshowthetransductionofthreeproteintransductiondomainsWefirstsuccessfullyconstructedthreerecombi
4、nantexpressionvectorsseparatelyincludingenhancedgreenfluorescentprotein(EGFP)andspecialproteintransductiondomain(PTD)：EGFPTATpET28a，EGFPhCECSOD—pET28aandEGFPAr97pET28aandthesethreefusionproteinswerehighlyexpressed、析也shak
5、ingflasksandwellpurifiedwitllNiNTAaffinitychromatographypurification：EGFPTATEGFP—hCEC—SODandEGFPAr97wealsosetuplargescaleisolationandpurificationprotocolsforthesethreefusionproteins，thepurityofwhichismorethan90％Thepilots
6、tudyontransductionofthreePTDs、析mEGFPWasdonethestudyconfirmedtheexsiting行ansducfionofthethreePTDs，andindicatedthatthethreePTDSshowedrelativelygoOdtransductiOnin13hrsSecondlytwofusionproteinsseparatelyincludingTATandhC—ECS
7、ODwereexpressed、^ritllshakingflasksandwellpurifiedwitllNiNTAaffinitychromatographypurification：TATApoptinandhC—ECSODApoptinthepurityofthesetwoismorethan90％nepreliminarypharmacologicalactivitystudyshowedthatthetwofusionpr
8、oteinswithApoptinwerebotllprovedhi曲apoptosisactivityagainsttumorcellusinginvitroHeLacellinhibitiontestthisconfirmedtheexsitingtransductionofthetwoPTDs：TATandhC—EC—SODthedifferenceofIC50ofTATApoptinandhCECSODApoptinonHeLc
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