雞傳染性法氏囊病病毒超強(qiáng)毒株細(xì)胞克隆化毒在回雞過程中致病性與VP2基因變異比較.pdf

1、該課題試圖將一個vvIBDV中國株在細(xì)胞培養(yǎng)上克隆化后,再返回SPF雞連續(xù)傳代,通過比較若干病毒克隆返雞后不同代次的傳代毒致病性與VP2基因變異,來從另一個角度驗(yàn)證VP2高變區(qū)變異是否與致病性有關(guān).在實(shí)施國家自然基金重大項(xiàng)目的過程中,該人所在實(shí)驗(yàn)室從全國30個省市已經(jīng)收集了72株IBDV株,在對其中40株IBDV株進(jìn)行毒力、血清學(xué)以及致病性檢測的基礎(chǔ)上,選擇一個毒力最強(qiáng)的、致死率高達(dá)90％的vvIBDV GX8/99株作為該課題研究的起

2、點(diǎn).將vvIBDV GX8/99株通過傳代,研究從原始毒(雞源囊毒)→雞胚毒→細(xì)胞適應(yīng)毒→細(xì)胞克隆化毒→回傳SPF雞傳代毒(雞源毒)一個輪回過程中系列毒株致病性的變化規(guī)律及其與核苷酸、氨基酸變異之間的關(guān)系.初步掌握了vvIBDV在整個傳代循環(huán)過程中的致病特點(diǎn),研究了vvIBDV從未經(jīng)克隆的病毒的"群體致病性"到克隆化病毒的"個體致病性"的變化規(guī)律.引進(jìn)這一方法將有助于揭示vvIBDV的演變規(guī)律和毒力改變的分子基礎(chǔ),有助于解決超強(qiáng)毒毒力如

3、何增強(qiáng)?超強(qiáng)毒能否致弱?致弱過程中核苷酸和氨基酸序列發(fā)生了怎樣的變化?這種變化與病毒生物學(xué)特性有著怎樣的關(guān)系?弱毒株的生物學(xué)特性如何等急需解決的問題.該課題主要研究內(nèi)容及其研究結(jié)果包括如下幾個方面:1.雞傳染性法氏囊病病毒超強(qiáng)毒GX8/99株傳代培養(yǎng)及病毒的克隆化.2.雞傳染性法氏囊病病毒超強(qiáng)毒GX8/99株原始囊毒及其傳代毒的致病性試驗(yàn).3.雞傳染性法氏囊病病毒超強(qiáng)毒GX8/99株原始囊毒的細(xì)胞適應(yīng)克隆化毒回傳SPF雞后的致病性VP<