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1、 本研究選用CVI988疫苗作載體,插入IBDVVP2保護性抗原基因,篩選重組病毒,并對其免疫特性進行了研究。1IBDVJS株VP2基因真核表達載體的構(gòu)建及其免疫特性 本研究用RT PCR方法從IBDY JS株中擴增出YP2基因,序列測定結(jié)合致病性,實驗證明,IBBV JS株是一株超強毒株;用構(gòu)建的真核表達質(zhì)粒pcDNA3.1 -VP2免疫雛雞,能誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性抗VP2抗體,對IBDV強毒攻擊的保護率為67﹪;構(gòu)建了含eGFP報告
2、基因的轉(zhuǎn)移載體pUC18-US10-eGFP,通過與活病毒同源重組,獲得了表達eGFP的rCV1988-US10-eGFP,經(jīng)多次傳代證明rCVI988-US10-eGFP在感染的CEF細胞中能穩(wěn)定表達eGFP,且其形態(tài)和生長特性與親本毒株一致;構(gòu)建了含eGFP-VP2融合基因的轉(zhuǎn)移載體pUC18-US10-eGFP-VP2,通過與活病毒同源重組,獲得了穩(wěn)定表達eGFP-VP2融合蛋白的重組病毒rCVI988-eGFP-VP2;構(gòu)建了含
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