傳染性法氏囊病病毒FX株VP2基因的克隆、表達(dá)及其免疫原性研究.pdf

1、利用RT-PCR擴(kuò)增了IBDV阜新(FX)分離株VP2基因，并對(duì)擴(kuò)增序列進(jìn)行了分析。結(jié)果顯示FX株VP2基因全長(zhǎng)1536bp、編碼512個(gè)氨基酸：與GenBank中己報(bào)道的IBDV毒株相比，VP2基因核苷酸的同源性為54.4％-99.3％，推導(dǎo)的氨基酸序列同源性為46.1％-98.4％；遺傳進(jìn)化分析表明，F(xiàn)X株VP2基因與Gt株同源性最高；用DNAstar軟件對(duì)FX株VP2蛋白抗原表位進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其與B87(吉林)株和B87 VP2(

2、南京)株存在差異，說明FX株與疫苗株VP2蛋白抗原特性存在差異。 利用原核表達(dá)質(zhì)粒pGEX-6P-1，對(duì)VP2基因進(jìn)行了表達(dá)。結(jié)果表明，經(jīng)酶切和PCR鑒定，表明獲得了含VP2基因的重組蛋白pGEX-6P-1-VP2。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21(DE3)，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)，受體菌BL21(DE3)能表達(dá)結(jié)構(gòu)蛋白基因VP2，經(jīng)SDS-PAGE及Westem Blotting分析，表達(dá)產(chǎn)物分子量約40KDa，且能與IBDV陽性血清