雞傳染性法氏囊病病毒的山東株的分離及免疫原性研究.pdf

1、雞傳染性法氏囊病是由雞傳染性法氏囊病病毒引起的一種免疫抑制性傳染病，造成免疫缺陷，造成雞對(duì)細(xì)菌和其它病毒等致病因子的易感性增加，給養(yǎng)雞業(yè)造成嚴(yán)重的危害。近年來，由于疫苗的使用，使本病在一定程度上得到了控制。但是，自20世紀(jì)80年代以后，世界上先后出現(xiàn)變異毒株及超強(qiáng)毒株，為法氏囊病的免疫防治帶來一定的難度。到目前為止，我國已有多處報(bào)道發(fā)生IBDV超強(qiáng)毒株的感染，造成IBD疫苗免疫失敗，由此，尋找更合理有效的防治辦法成為控制IBD流行的當(dāng)務(wù)

2、之急。
　　 目前，病毒性傳染病仍無有效的藥物進(jìn)行治療，疾病的控制仍以免疫預(yù)防為主，因此尋找免疫原性好的IBD流行毒株成為免疫預(yù)防的關(guān)鍵所在。本試驗(yàn)通過對(duì)山東省內(nèi)不同地區(qū)法氏囊病流行情況的調(diào)查，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)鑒定得到一株IBDV野毒株CP株，同時(shí)對(duì)該毒株進(jìn)行馴化得到一株細(xì)胞適應(yīng)毒CCPV，對(duì)此兩株毒進(jìn)行免疫效力試驗(yàn)，證明該毒株具有較好的免疫原性并對(duì)疫苗株有交叉保護(hù)作用。
　　 本試驗(yàn)共分三部分：
　　 實(shí)驗(yàn)一：

3、雞傳染性法氏囊野毒株的分離鑒定。
　　 本試驗(yàn)通過對(duì)山東省內(nèi)不同地區(qū)法氏囊流行情況的調(diào)查，采集疑似病癥的病料829份，根據(jù)病雞的流行病學(xué)和臨床癥狀，結(jié)合瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)及回歸易感染雞試驗(yàn)方法，初步選出陽性病料118份。其次對(duì)陽性病料通過外源病毒檢測，經(jīng)過上述方法的篩選，順利得到一株IBD野毒株CPV，該毒株臨床癥狀、病理剖檢變化典型，發(fā)病快，病程短，病死率高，屬于超強(qiáng)毒力毒株。
　　 實(shí)驗(yàn)二：IBDV分離株的傳代培養(yǎng)。<

4、br>　　 試驗(yàn)證明CP株不能直接適應(yīng)細(xì)胞，要想得到一株細(xì)胞適應(yīng)毒需要較長的時(shí)間，所以，本試驗(yàn)仍以雞胚培養(yǎng)為主，以優(yōu)化雞胚培養(yǎng)方式，使該方法更適合IBDV的培養(yǎng)。IBDV在雞胚中以CAM和肝含毒量為最高，在尿囊液中為最低，由于在試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)雞胚肝腫大，肺、腎及卵黃囊出血嚴(yán)重，那么將雞胚全部收獲會(huì)不會(huì)影響到IBDV的病毒含量呢？本試驗(yàn)通過比較雞胚的CAM、雞胚胚體、卵黃及尿囊液的混合物與CAM病毒含量證明這一觀點(diǎn)成立，同時(shí)在雞胚培養(yǎng)的

5、過程中對(duì)CPV進(jìn)行細(xì)胞馴化，經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)至第八代出現(xiàn)了細(xì)胞病變，得到細(xì)胞適應(yīng)毒CCP株。
　　 實(shí)驗(yàn)三：雞傳染性法氏囊病病毒山東分離株滅活苗的制備及應(yīng)用。
　　 本試驗(yàn)分別將CP株和法氏囊BJQ902制備成油乳劑滅活疫苗，免疫21日齡SPF雞進(jìn)行免疫效力實(shí)驗(yàn)，通過抗體監(jiān)測和攻毒保護(hù)試驗(yàn)得出CP株在免疫后第二周相對(duì)疫苗株產(chǎn)生抗體較高，抗體滴度整齊，對(duì)CP株和疫苗株攻擊均能產(chǎn)生較高保護(hù)率，而疫苗株免疫后對(duì)CP株的攻擊抵抗率較低