大白菜冷相關(guān)基因的克隆及功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究采用同源基因克隆法,首先利用RT-PCR技術(shù)從耐低溫植物大白菜中得到了兩個cDNA克隆,即RT680和RT750,再通過RACE技術(shù)分別獲得了RT680的3'端、5'端及RT750的3'端.RT680加5'非翻譯區(qū)和3'非翻譯區(qū)的全長為955bp,內(nèi)含一個663bp的開放閱讀框,共編碼220個氨基酸,其推導(dǎo)肽鏈的分子量為25KDa,故將其命名為cor25.RT750加3'非翻譯區(qū)長度為979bp,內(nèi)含一個810bp的開放閱讀框,可

2、編碼269bp個氨基酸,推導(dǎo)肽鏈的分子量為30KDa,故將其命名為cor30.經(jīng)序列及功能分析,表明二者都是冷相關(guān)基因.經(jīng)同源查找及序列比較,發(fā)現(xiàn)cor25和cor30的氨基酸序列與擬南芥COR47的同源性分別為53.8﹪和59.4﹪,與擬南芥ERD10的同源性分別為59.4﹪和60.2﹪.進一步對cor25進行了遺傳轉(zhuǎn)化研究.將cor25成熟蛋白的編碼區(qū)構(gòu)建到pET30a載體系統(tǒng),并將該重組質(zhì)粒導(dǎo)入縮主菌BL21,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后表達

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