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1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文雄原核注射sMTPGH基因小鼠胚胎的體外培養(yǎng)姓名:孫燕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:張家驊2001.4.1西南農(nóng)盤(pán)走學(xué)硬士研寬生掌位論文InvitrocultureofthemouseembryosafterpronuclearmicroinjecfionofsMTPGHSunYanCollegeofanimalscienceandtechnologySouthwestAgricultⅫalUniv
2、ers她BeibeiChongqingchina400716ABSTRACTTherealestillsomeproblemsingenetransferinanimalsForexampleitisdifficultandcostlytopredicatetheefficiencyofthegenetransferTherefore,itisimportanttoculturethefertilizedeggstomorulaorbl
3、astocyststagefortransferringandidentifyforeigngeneintegrationingenomebeforetheembryostransfertoreceptors,inordertoincreaseefficiencyofproducingmmsgenicanimalsInthispapertheConstructthatsheepmetallothionein(sMT)genepromot
4、erdirectspiggrowthhormone(PGH)genewasmieroinjectedintothepronucleusofmouse’sfertilizedeggsThen,theeffectsofseveralculturemediaonovercomingthe2cellblockinembryodevelopmentwerestudied,theblastocystscontainingforeigngenewer
5、emeasuredbyusingPCRmethodAtotalof1697eg鏟collectedfrom58superovulationmiceofwhich1279eggswasinpronucleusstageandmicroinjectedwithsMTPGHandtherewere392eggssurvivedafiefmicroinjectionandwereculturedinvitrobythreemediaInthee
6、xperimentthefertilizedeggsovercomethe2cellblockanddevelopedtoblastocyststageinthemodifiedM16(raMl6)mediaInadditionthemMl6contentedepidermalgrowthfactm(EGF)impmvedblastocystratesatday3embryosculturedinvitroTheresultsshowe
7、dlllat12%。68%and90%embryospassedthe2cellblockanddevelopedto4cellstageand0,20%and43%developedtoblastocyststageinM16,mMl6andmMl6EGFmedia,respectivelyItsemsthattaurineplaysallimportantroleinovercomingthe2oetiblockduringtran
8、sgenicmouseembryodevelopmentandEGFmaybeDrodu∞somematerialwhichc蚰eliminatethetoxincarnefromtheembryosorthemediaThetransferredgenewasmeasuredbyusingPCRmethodin57blL鰣meysts4blL婦ystretentionsofforeigngeneTheresultsshowedthat
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