甜瓜CMe-ERF1和CMe-ERF2基因的功能研究.pdf_第1頁(yè)
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1、ERF轉(zhuǎn)錄因子即乙烯應(yīng)答因子(ethylene-responsive factor,ERF)是植物中普遍存在的一類龐大的轉(zhuǎn)錄因子家族,它們參與植物整個(gè)生命周期的生長(zhǎng)發(fā)育和多種生物學(xué)過(guò)程。近年來(lái),許多植物中的ERF基因被克隆,但對(duì)其功能的研究報(bào)道卻很少。
  本研究以甜瓜品種“河套蜜瓜”為研究材料,構(gòu)建了甜瓜CMe-ERF1和CMe-ERF2基因的超表達(dá)載體pPZP221(35S-ERF1-NOS)和pPZP221(35S-ERF2

2、-NOS)及RNAi表達(dá)載體pART27-ERF1和pART27-ERF2。通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法注射到甜瓜果肉中,并進(jìn)行表達(dá)分析。結(jié)果顯示,注射超表達(dá)載體菌液部位的果皮提前變黃,而注射RNAi表達(dá)載體菌液部位的果皮推遲變黃。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果表明,在瞬時(shí)超表達(dá)CMe-ERF1基因的果肉組織中,CAD(Cinnamyl Alcohol Dehydrogenase,肉桂醇脫氫酶)基因表達(dá)量上升,PG(Polygalacturonase,多聚

3、半乳糖醛酸酶)基因表達(dá)量未變,其它成熟相關(guān)基因表達(dá)量均下降;而在瞬時(shí)干擾CMe-ERF1基因表達(dá)的果肉組織中,除ACS(ACC synthase,ACC合成酶)基因外,其它成熟相關(guān)基因表達(dá)量均上升。在瞬時(shí)超表達(dá)CMe-ERF2基因的果肉組織中,ACS基因、PG基因和AAT(Alcohol Acyltransferases,?;D(zhuǎn)移酶)基因表達(dá)量上升,ACO(ACC oxidase,ACC氧化酶)基因和CAD基因表達(dá)量未變,其它成熟相關(guān)基

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