抗氧化劑的體外評價及在運輸應(yīng)激大鼠中的抗應(yīng)激效果研究.pdf

1、動物的運輸是畜牧生產(chǎn)中一個重要的環(huán)節(jié)，運輸應(yīng)激對動物生產(chǎn)性能、健康狀況等產(chǎn)生一系列負(fù)面影響。家畜在運輸應(yīng)激后使機體內(nèi)氧化和抗氧化失衡，導(dǎo)致機體內(nèi)發(fā)生氧化應(yīng)激。本研究旨在評價抗氧化劑維生素C、維生素E、α-硫辛酸、槲皮素和止痢草油的抗氧化能力和特性，并通過建立大鼠運輸應(yīng)激模型，比較這5種抗氧化劑緩解大鼠運輸應(yīng)激的效果，為家畜運輸應(yīng)激的營養(yǎng)調(diào)控提供理論依據(jù)。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1、不同抗氧化劑體外抗氧化效果評價及特性研究。利

2、用DPPH法測定維生素C、維生素E、槲皮素和止痢草油清除DPPH自由基的能力，結(jié)果表明抗氧化劑清除DPPH自由基的IC50如下:維生素C為0.0059mg/ml，維生素E為0.0249mg/ml，槲皮素為0.0051mg/ml，止痢草油為0.0687mg/ml，這4種抗氧化劑對DPPH自由基的清除能力大小順序為:槲皮素＞維生素C＞維生素E＞止痢草油。通過建立大鼠肝勻漿脂質(zhì)自氧化模型，測定維生素C、α-硫辛酸、維生素E、槲皮素和止痢草油的

3、脂質(zhì)自氧化抑制率，各抗氧化劑的IC50如下:維生素C為0.255mg/ml，維生素E為0.0052mg/ml，α-硫辛酸為2.06mg/ml，槲皮素為0.0058mg/ml，止痢草油為0.067mg/ml，抑制脂質(zhì)自氧化的高低順序為:維生素E＞槲皮素＞止痢草油＞維生素C＞α-硫辛酸。
　　2、抗氧化劑對運輸應(yīng)激大鼠的抗應(yīng)激效果的研究。試驗選擇7-8周齡SPF級雄性Wistar大鼠70只，隨機分成7組，每組10個重復(fù)，每個重復(fù)1只大

4、鼠。其中非應(yīng)激對照組和應(yīng)激對照組均飼喂基礎(chǔ)日糧，5個日糧處理組在基礎(chǔ)日糧中分別添加1.5g/kg維生素C、2g/kgα-硫辛酸、1g/kg維生素E、1g/kg槲皮素、100mg/kg止痢草油。試驗期28d，試驗期結(jié)束后，應(yīng)激組大鼠根據(jù)運輸應(yīng)激模擬條件(大鼠置于35℃恒溫?fù)u床中，60r/min，2h)進行處理，運輸應(yīng)激處理結(jié)束后乙醚麻醉并屠宰大鼠，收集樣品。測定血清激素水平、血清和肝臟中抗氧化系統(tǒng)指標(biāo)、空腸組織形態(tài)結(jié)構(gòu)及空腸HspsmRN

5、A表達量。結(jié)果顯示:
　　1)添加止痢草油能顯著增加大鼠體重、日增重和日采食量(P＜0.05)，添加維生素E顯著增加大鼠體重(P＜0.05)，添加槲皮素可以顯著增加大鼠的平均日采食量（P＜0.05）。
　　2)運輸導(dǎo)致大鼠體重顯著下降，體溫顯著升高(P＜0.05)。添加各抗氧化劑后，體重失重與應(yīng)激對照組無顯著差異(P＞0.05)，運輸后維生素C組大鼠體溫顯著高于其他各組(P＜0.05)。
　　3)運輸應(yīng)激處理后應(yīng)激對照

6、組大鼠血清中皮質(zhì)醇和去甲腎上腺素水平均顯著升高(P＜0.05)。與應(yīng)激對照組相比，日糧添加維生素E顯著降低了去甲腎上腺素水平(P＜0.05)。
　　4)與非應(yīng)激組相比，應(yīng)激對照組的血清T-AOC顯著降低(P＜0.05)，MDA水平顯著升高(P＜0.05)，SOD和GSH-Px活力均顯著降低(P＜0.05);添加抗氧化劑后，各抗氧化劑組與應(yīng)激對照組相比，MDA水平顯著降低(P＜0.05)，SOD活力顯著升高(P＜0.05)，維生素C

7、、維生素E與止痢草油組T-AOC顯著升高，維生素E、槲皮素、α-硫辛酸和止痢草油組GSH-Px活力均顯著升高(P＜0.05)。
　　5)抗氧化劑對運輸應(yīng)激大鼠肝臟抗氧化功能的影響:應(yīng)激對照組的肝臟T-AOC顯著下降，脂質(zhì)過氧化物MDA水平顯著升高(P＜0.05)。而添加維生素C、維生素E、槲皮素和止痢草油均能提高T-AOC，降低MDA水平(P＜0.05)。與非應(yīng)激對照組相比，應(yīng)激對照組均顯著降低了肝臟的SOD和GSH-Px活力(P

8、＜0.05)，添加槲皮素和止痢草油組可以提高SOD和GSH-Px活力(P＜0.05)，而添加α-硫辛酸組肝臟的SOD和GSH-Px活力與應(yīng)激對照組沒有顯著差異(P＞0.05)。
　　6)大鼠空腸組織結(jié)構(gòu)形態(tài)分析:應(yīng)激對照組顯著提高了隱窩深度，顯著降低了空腸絨毛高度和絨毛高度與隱窩深度比(P＜0.05)。添加維生素E、α-硫辛酸、槲皮素和止痢草油均能顯著提高絨毛高度(P＜0.05);添加維生素C、維生素E、槲皮素均能降低隱窩深度(P

9、＜0.05);添加這5種抗氧化劑均能顯著提高絨毛高度與隱窩深度比(P＜0.05)。各日糧處理組的空腸絨毛高度、隱窩深度、絨毛高度與隱窩深度比，與非應(yīng)激對照組相比差異不顯著(P＞0.05)。
　　7)大鼠空腸HspsmRNA表達量的變化:應(yīng)激對照組與非應(yīng)激對照組相比，大鼠空腸Hsp27、Hsp70、Hsp90mRNA表達量均顯著升高(P＜0.05);日糧添加維生素C、α-硫辛酸、維生素E、槲皮素和止痢草油均能顯著降低大鼠空腸Hsp2

10、7、Hsp70、Hsp90mRNA表達量(P＜0.05)。
　　綜上所述，本研究的結(jié)論是:1）由體外試驗可得，槲皮素和維生素E清除DPPH自由基和抑制脂質(zhì)自氧化的效果較好。2）日糧中添加維生素E、槲皮素和止痢草油均能增加動物采食量和體重，改善動物的生長性能。3）由大鼠運輸應(yīng)激模型可知，補充抗氧化劑均能降低大鼠血清和肝臟中脂質(zhì)過氧化，提高抗氧化酶SOD和GSH-Px活力，提高機體抗氧化能力。其中α-硫辛酸在動物體內(nèi)發(fā)揮自由基清除能力