柿單寧含量測(cè)定及腸道菌群對(duì)其代謝的研究.pdf

1、柿單寧是提取于柿果中的一種高聚合度的多酚類(lèi)化合物，其結(jié)構(gòu)相當(dāng)復(fù)雜，前期研究發(fā)現(xiàn)柿單寧具有抗氧化、抗炎、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化等多種生理活性。因此對(duì)于柿果及柿產(chǎn)品中單寧含量的精確測(cè)定對(duì)于評(píng)價(jià)柿單寧的健康效益及其風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估極其重要。鑒于采用常規(guī)的測(cè)定多酚含量的方法進(jìn)行柿單寧的定量測(cè)定時(shí)，測(cè)定值與真實(shí)值存在極大的偏差，本研究選定了采用福林酚法、香草醛硫酸法、正丁醇鹽酸法及4-二甲基氨基肉桂醛法等四種不同方法測(cè)定柿單寧含量時(shí)所需的最佳標(biāo)準(zhǔn)品。同時(shí)還比較

2、了腸道菌群對(duì)四種不同連接類(lèi)型的二聚體——B型連接EC二聚體、A型連接EC二聚體、A型連接ECG二聚體及A型連接EGCG二聚體的體外代謝以及柿單寧在大鼠體內(nèi)的代謝。主要研究結(jié)果如下:
　　1.柿單寧含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品的選定
　　制備柿單寧不同級(jí)分PT20、PT40、PT60，并采用甲醛沉淀法測(cè)定其含量分別為91.40％、94.40％、92.21％。在福林酚法測(cè)定柿單寧含量時(shí)，采用PT40作為其最佳標(biāo)準(zhǔn)品;在香草醛硫酸法實(shí)驗(yàn)中，推薦

3、采用A型連接ECG二聚體及EGCG二聚體作為標(biāo)準(zhǔn)品，也可選用ECG單體作為其標(biāo)準(zhǔn)品;在正丁醇鹽酸法實(shí)驗(yàn)中，采用PT40作為標(biāo)準(zhǔn)品為最佳;因?qū)嶒?yàn)中各種標(biāo)準(zhǔn)品在4-二甲基氨基肉桂醛法中的顯色效果都比較差，因此該法并不適合于測(cè)定柿單寧的含量。
　　2.大鼠離體腸道菌群對(duì)四種二聚體的代謝
　　四種不同連接類(lèi)型的二聚體在腸道菌群的作用下均發(fā)生了不同程度的代謝。并且呈現(xiàn)出不同的降解速率，其中A型連接EC二聚體最為穩(wěn)定，降解速率最慢，其次

4、為B型連接EC二聚體，A型連接ECG二聚體與A型連接EGCG二聚體的代謝速率相差不大，且降解最快。
　　四種不同連接類(lèi)型的二聚體經(jīng)過(guò)大鼠腸道菌群的作用后所得的代謝產(chǎn)物既有相同也存在著差異。B型連接EC二聚體與A型連接EC二聚體代謝后都生成了羥苯基乙酸。A型連接EC二聚體經(jīng)過(guò)代謝轉(zhuǎn)變?yōu)锽型EC二聚體;B型EC二聚體與A型EGCG二聚體的代謝產(chǎn)物中均檢測(cè)到了其單體化合物兒茶素及EGCG。
　　采用總抗氧化能力、清除ABTS+·能

5、力、清除DPPH·能力三個(gè)體系評(píng)價(jià)腸道菌群代謝原花青素二聚體后的菌液的抗氧化能力。結(jié)果顯示，在總抗氧化能力以及清除ABTS+·能力兩個(gè)體系中，原花青素二聚體與腸菌液共同培養(yǎng)6h后，其抗氧化活性均有了不同程度的增加，繼續(xù)培養(yǎng)至12h、24h后，其抗氧化活性又明顯降低。在清除DPPH·能力實(shí)驗(yàn)中，其抗氧化能力也并未降低，這均表明腸道菌群對(duì)原花青素的作用會(huì)在不同程度上提高其抗氧化能力。
　　3.柿單寧在大鼠體內(nèi)的代謝
　　大鼠空腹