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1、ClassifiedIndex:Confidential(yes/no):noCode:10224NO1106365DissertationfortheMasterDegreeResearchonKeyFactorsRestrictingEfficiencyofSpermMediatedGeneTransferCandidate:JiaoMingxiaSupervisor:ProfLiuZhonghuaDegreeCategory:Ma
2、sterofAgricultureCollege:NortheastAgriculturalUniversityFirstleveldiscipline:VeterinaryScienceSecondleveldiscipline:BasicVeterinaryScienceHarbinChinaJune2014東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文235Cv3標(biāo)記DNA的準(zhǔn)備17236精子的準(zhǔn)備及獲能17237精子與外源DNA共孵育17238卵
3、母細(xì)胞的收集及體外受精18239合子期胚胎Cy3DNA熒光信號(hào)檢測(cè)182310頂體反應(yīng)的誘導(dǎo)及檢測(cè)182311外源DNA共孵育精子誘導(dǎo)頂體反應(yīng)192312免疫熒光~192313囊胚期PCR檢測(cè)192314反轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)202315質(zhì)粒胞質(zhì)內(nèi)注射202316統(tǒng)計(jì)分析一213結(jié)果與分析2231不同質(zhì)粒結(jié)構(gòu)DNA與小鼠精子共孵育制備轉(zhuǎn)基因胚胎2232外源DNA不影響小鼠精子的活率2333小鼠精子能有效的結(jié)合和內(nèi)化外源DNA2434精子經(jīng)頂體
4、反應(yīng)會(huì)丟失部分?jǐn)y帶的外源DNA27341P。濃度對(duì)小鼠精子頂體反應(yīng)效率的影響27342P4誘導(dǎo)頂體反應(yīng)時(shí)間對(duì)小鼠精子項(xiàng)體反應(yīng)效率的影響27343頂體反應(yīng)對(duì)外源DNA攜帶效率的影響一2835精子能夠介導(dǎo)外源DNA進(jìn)入卵母細(xì)胞2936SMGTIVF制備轉(zhuǎn)基因胚胎3037胞質(zhì)內(nèi)質(zhì)粒注射324討論3341不同質(zhì)粒結(jié)構(gòu)DNA與小鼠精子共孵育制備轉(zhuǎn)基因胚胎3342精子介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移效率關(guān)鍵影響因素研究33421外源DNA對(duì)精予活率的影響33422小鼠
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