條石鯛微衛(wèi)星性別特異標記篩選及子代家系的遺傳分析.pdf

1、條石鯛是我國重要的海水養(yǎng)殖魚類，主要分布在黃海、東海和臺灣海峽。因其具有較高的商業(yè)價值和觀賞價值，條石鯛的人工養(yǎng)殖在近幾年發(fā)展迅速。為了條石鯛養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展以及保護野生資源的需要，本文從分子育種的實際需求出發(fā)，主要在以下三個方面展開研究:1.開發(fā)多態(tài)微衛(wèi)星標記;2.篩選性別連鎖的微衛(wèi)星標記，建立遺傳性別鑒定方法;3.分析AFLP標記在親代及子代家系的遺傳規(guī)律，旨在為構(gòu)建高密度遺傳連鎖圖譜奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.多

2、態(tài)微衛(wèi)星標記開發(fā)
　　采用FIASCO方法構(gòu)建了1個SSR富集文庫:(CA)10從中挑取100個單克隆進行PCR鑒定，有70個是陽性克隆，陽性率是70％。挑取60個克隆進行測序，測序結(jié)果獲得49條序列含有微衛(wèi)星，陽性序列比例為81.7％，對這60條序列進行自身比對，網(wǎng)上BLAST比對后，成功設(shè)計了17對引物，最終獲得了了15對多態(tài)性微衛(wèi)星引物。等位基因數(shù)從4到9之間。位點的觀測雜合度（Ho）處于0.267～0.767之間，平均為0

3、.516;位點的期望雜合度(He)0.395～0.859，平均為0.724。11個微衛(wèi)星位點符合Hardy-Weinberg平衡。15個位點均不存在連鎖不平衡現(xiàn)象。
　　2.性別連鎖微衛(wèi)星標記的篩選
　　篩選到條石鯛性別連鎖的微衛(wèi)星標記，發(fā)現(xiàn)了雄性特異的等位基因，并針對該等位基因設(shè)計了特異引物，建立了基于微衛(wèi)星技術(shù)的條石鯛遺傳鑒別方法。此方法具有準確、靈敏、可靠等優(yōu)點，不僅對魚類性別決定機制研究具有重要科學(xué)價值，而且對魚類性

4、別控制和選擇育種具有重要的意義和應(yīng)用價值。
　　3.AFLP標記在親代及子代家系的遺傳規(guī)律分析
　　采用14對AFLP選擇性引物在條石鯛家系中共擴增出528個位點，其中多態(tài)位點227個，多態(tài)比例為42.9％。在227個分離的位點中，符合孟德爾遺傳規(guī)律的位點共138個。偏分離的位點89個。分離比為3∶1的位點共有118個，占分離位點數(shù)的52.9％。分離比為1∶1的位點109個，占分離位點數(shù)的48.0％，14對引物檢測到有效等位