綿羊卵母細胞及體外早期胚胎中nNOS、eNOS、iNOS的表達.pdf

1、一氧化氮(Nitric oxide，NO)作為一種具有自由基性質的多功能活性分子，在體內(nèi)多種信號傳遞中起重要作用。體內(nèi)的NO主要由一氧化氮合酶(NOS)催化產(chǎn)生，現(xiàn)已確認的NOS包含三種亞型:神經(jīng)型(nNOS)、誘導型(iNOS)、內(nèi)皮型(eNOS)。由于NO的半衰期非常短而且極不穩(wěn)定，而NOS是NO產(chǎn)生的限速酶，因此NOS的表達量可以線性反映出NO的生成量。隨著對NO的廣泛研究，發(fā)現(xiàn)其與生殖存在著必不可少的某些聯(lián)系，特別在動物個體發(fā)育

2、的早期。為了了解一氧化氮合酶(NOS)的三個亞型在綿羊卵母細胞體外成熟及早期胚胎中的表達情況，本實驗，運用體外培養(yǎng)體系獲得未成熟卵母細胞、成熟卵母細胞及不同發(fā)育時期的早期胚胎（2-細胞、4-細胞、8-細胞、桑葚胚、囊胚），應用實時熒光定量PCR技術檢測目標基因nNOS、eNOS、iNOS相對表達情況。結果顯示:
　　1.在綿羊未成熟卵母細胞、成熟卵母細胞和早期胚胎發(fā)育各階段，nNOS、eNOS、iNOS mRNA均有表達。

3、　　2.綿羊卵母細胞成熟過程中，nNOS mRNA相對表達量在未成熟卵母細胞期及成熟卵母細胞期均顯著高于eNOS、iNOS的表達量(p＜0.05)，并且在成熟卵母細胞中的表達顯著高于未成熟卵母細胞(p＜0.05)。
　　3.早期胚胎發(fā)育過程中，nNOS、iNOS mRNA相對表達水平顯著高于eNOS的表達(p＜0.05)，并且表達趨勢相似，具體呈現(xiàn)出4-細胞期較2-細胞有降低趨勢;8-細胞期的表達量顯著升高(p＜0.05)并在桑葚