海參和海星腦苷脂抗腫瘤及改善癌癥惡病質(zhì)作用的研究.pdf

1、腦苷脂屬于鞘脂類，是生物細(xì)胞膜中廣泛存在的一類重要的活性脂質(zhì)，具有抗腫瘤、抗病毒、抗真菌、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等多種活性功能。腦苷脂是存在于海參和海星體壁中的主要活性成分。目前關(guān)于海參和海星腦苷脂抗腫瘤活性的報(bào)道很少且只停留在體外實(shí)驗(yàn)水平。故本實(shí)驗(yàn)從海參綱的海地瓜和海星綱的多棘海盤車中分別提取腦苷脂，在體外和體內(nèi)水平系統(tǒng)研究了海參和海星腦苷脂抗腫瘤活性和改善癌癥惡病質(zhì)作用及其作用機(jī)制，并對(duì)其構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行了初步探討。主要研究結(jié)果如下：
　

2、　 本文首先采用MTT法對(duì)海參腦苷脂及其長(zhǎng)鏈堿的體外抗腫瘤活性進(jìn)行了篩選。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，海參腦苷脂及其長(zhǎng)鏈堿可抑制HepG2、S180、95D、Caco-2和HGC-27等多種腫瘤細(xì)胞的增殖活性，且有明顯的時(shí)間和劑量效應(yīng)關(guān)系，表現(xiàn)出廣泛的抗腫瘤活性，其中長(zhǎng)鏈堿的體外抗腫瘤活性顯著優(yōu)于海參腦苷脂。隨后，建立S180腹水瘤小鼠模型，并通過灌胃和腹腔注射兩種給藥方式在體內(nèi)水平驗(yàn)證海參腦苷脂及其長(zhǎng)鏈堿的抗腫瘤作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，灌胃或腹腔注射長(zhǎng)鏈

3、堿均可顯著延長(zhǎng)S180腹水瘤小鼠的生存時(shí)間，表現(xiàn)出良好的體內(nèi)抗腫瘤作用。但海參腦苷脂只有通過灌胃方式才可表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤活性，且抗腫瘤效果與長(zhǎng)鏈堿相當(dāng)，推測(cè)該活性與腦苷脂在腸道中經(jīng)消化吸收后被分解為長(zhǎng)鏈堿相關(guān)。該研究結(jié)果提示海參腦苷脂抗腫瘤作用的主要活性單元是其長(zhǎng)鏈堿。
　　 為了進(jìn)一步探究腦苷脂抗腫瘤活性的構(gòu)效關(guān)系及其作用機(jī)制，本文又通過體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)以及體內(nèi)建立S180肉瘤小鼠和腹水瘤小鼠兩個(gè)動(dòng)物模型，觀察并比較了海參和海

4、星腦苷脂抗腫瘤作用效果并探究其作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，海參腦苷脂的體外抗腫瘤活性不如海星腦苷脂，但體內(nèi)抗腫瘤活性卻優(yōu)于海星腦苷脂，可能與兩種腦苷脂的脂肪酸和長(zhǎng)鏈堿組成迥異以及經(jīng)體內(nèi)代謝后產(chǎn)物的活性差異相關(guān)。機(jī)制研究結(jié)果表明，海參和海星腦苷脂可通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡抑制腫瘤細(xì)胞的增殖活性，并能通過提高機(jī)體的免疫功能和抗氧化能力以及通過線粒體信號(hào)通路啟動(dòng)腫瘤細(xì)胞凋亡等途徑抑制肉瘤的生長(zhǎng)、腹水量及腹水瘤細(xì)胞的存活并延長(zhǎng)腹水小鼠生存時(shí)間。

5、　　 癌癥惡病質(zhì)是惡性腫瘤病患中常見的多因素導(dǎo)致的浪費(fèi)型代謝綜合癥，主要表現(xiàn)為極度消瘦，體內(nèi)脂肪和肌肉組織大量分解，是導(dǎo)致癌癥病患生活質(zhì)量嚴(yán)重降低和高死亡率的主要原因之一。故本文利用S180腹水瘤小鼠模擬癌癥惡病質(zhì)模型，比較研究了海參和海星腦苷脂改善癌癥惡病質(zhì)作用，并在細(xì)胞因子和分子水平上闡明其作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，海參和海星腦苷脂均表現(xiàn)出良好的改善癌癥惡病質(zhì)功效，均可顯著延緩癌癥惡病質(zhì)小鼠體重下降，抑制脂肪和肌肉組織分解。對(duì)其機(jī)制

6、研究表明，海參和海星腦苷脂可通過以下幾條途徑改善癌癥惡病質(zhì)：可以抑制促惡病質(zhì)細(xì)胞因子TNF-α、IL-1和IL-6的分泌；可以抑制脂肪組織脂肪分解酶ATGL和HSL及脂肪動(dòng)員因子ZAG的表達(dá)，抑制脂解：可以促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化、葡萄糖和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)及攝取，上調(diào)脂肪組織中SREBP-1c調(diào)控的脂肪合成基因的表達(dá)，促進(jìn)脂肪合成；還可以抑制脂肪利用相關(guān)基因UCP2和PGC-1α的mRNA表達(dá)。
　　 有研究報(bào)道，海星磷脂富含EPA和DHA等

7、多不飽和脂肪酸，且表現(xiàn)出良好的抗腫瘤活性。最后，本文從多棘海盤車中提取磷脂并與海星腦苷脂復(fù)配，比較研究了海星腦苷脂及其磷脂復(fù)配后與腦苷脂、磷脂單獨(dú)使用時(shí)體外和體內(nèi)抗腫瘤活性的差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，海星腦苷脂及其磷脂復(fù)配后抗腫瘤活性要顯著優(yōu)于海星腦苷脂、磷脂單獨(dú)使用。
　　 本文首次系統(tǒng)研究了海參和海星腦苷脂抗腫瘤和改善癌癥惡病質(zhì)的活性，并對(duì)其結(jié)構(gòu)和活性差異進(jìn)行了比較，初步闡明了其作用機(jī)制。同時(shí)首次發(fā)現(xiàn)海星腦苷脂及其磷脂復(fù)配使用時(shí)表