馬唐生防菌Col-68(Colletotrichum hanaui)發(fā)酵工藝及菌藥復(fù)配的相關(guān)研究.pdf

1、馬唐（Digitaria sanguinalis）是一種常見的農(nóng)田惡性雜草，分布廣泛，且不易防除?，F(xiàn)階段大都利用化學(xué)除草劑進(jìn)行防除。然而，化學(xué)除草劑的長期使用容易造成環(huán)境污染、導(dǎo)致雜草耐藥性增加等，對農(nóng)業(yè)發(fā)展的良性循環(huán)危害巨大。生物防治則因安全高效，成為目前除草劑進(jìn)一步開發(fā)的熱點(diǎn)。然而目前多數(shù)生物除草劑研究開發(fā)進(jìn)展緩慢，使得真正商品化生產(chǎn)的生物除草劑非常少。菌株Col-68(Colletotrichum hanaui)是本實(shí)驗(yàn)室從馬唐罹

2、病葉片上分離得到的炭疽病菌，前期試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，該菌對馬唐具有很強(qiáng)的專性致病力，但并不侵染水稻、棉花、玉米、大豆、小麥、花生等經(jīng)濟(jì)作物及主要草坪草，具有很高的生物安全性。此前已對該菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了詳細(xì)研究，并進(jìn)行了遺傳改良。
　　 對生物除草劑潛力菌株的進(jìn)一步開發(fā)還需要對該菌的發(fā)酵條件做進(jìn)一步研究，因此在炭疽菌Col-68對雜草馬唐表現(xiàn)良好生防特性研究的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)以Col-68發(fā)酵濾液對馬唐種子根、芽生長的抑制率為活性指標(biāo)

3、，綜合不同培養(yǎng)條件下菌株產(chǎn)孢的差異，利用單因素篩選試驗(yàn)篩選出了適合該菌株發(fā)酵的不同碳氮源、碳氮比及初始碳源適宜濃度。研究結(jié)果表明，在初始pH=6.5，每300 mL錐形瓶裝液120 mL，接種100μL菌原液，28℃、160 r·min-1震蕩培養(yǎng)10d的最佳發(fā)酵條件下，菌株活性具有顯著差異，以蔗糖為碳源時Col-68活性、產(chǎn)孢量以及對馬唐根長抑制率最高，蔗糖濃度在30～50 g·L-1之間時菌株產(chǎn)孢量以及對馬唐根長抑制率較高;發(fā)酵最適

4、宜利用的氮源為硝酸鈉，最佳碳氮比則為2.5∶1。同時，不同條件下的發(fā)酵濾液對馬唐根生長的抑制率均明顯高于對芽生長的抑制率。
　　 現(xiàn)階段在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上生物除草劑的使用遠(yuǎn)遠(yuǎn)無法代替化學(xué)除草劑的使用，然而如果能找到一種或幾種能與病原菌聯(lián)合使用的除草劑，從而大幅度減少化學(xué)除草劑的使用量同時達(dá)到雜草防除的目的是非常有意義的。微生物除草劑與低劑量的化學(xué)除草劑復(fù)配使用可以有效提高單獨(dú)使用的除草效率，菌藥復(fù)配具擴(kuò)大殺草譜，改變寄主選擇性，降低除

5、草成本等多種優(yōu)勢。試驗(yàn)研究了菌藥復(fù)配研究選用不同濃度的常用除草劑阿特拉津、百草枯、精吡氟禾草靈，與馬唐生防菌株Col-68混合培養(yǎng)對其主要生物學(xué)指標(biāo)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn):不同濃度、種類的除草劑對菌絲生長和孢子萌發(fā)影響不同，其中精吡氟禾草靈和阿特拉津?qū)赕咦用劝l(fā)具有一定增效作用，且在降低使用濃度時對菌絲生長抑制逐漸減少。精吡氟禾草濃度小于15 mg·mL-1和阿特拉津濃度小于100 mg·mL-1時，對菌絲生長抑制幾乎消失。除草劑百草枯對菌