藍(lán)莓腐敗菌的分離鑒定及復(fù)配多糖抑菌作用研究.pdf

1、藍(lán)莓屬于漿果類果實(shí)，含水量高，采后藍(lán)莓果實(shí)極易腐爛，發(fā)生失水、腐爛等現(xiàn)象，不耐貯藏，這一特性極大地限制了藍(lán)莓的鮮果的貨架期和商品價(jià)值。本文對(duì)藍(lán)莓腐敗菌進(jìn)行分離鑒定，采用三種多糖進(jìn)行抑菌活性研究，確定最佳多糖復(fù)配比例，研究復(fù)配多糖對(duì)藍(lán)莓腐敗菌的抑菌活性、穩(wěn)定性和抑菌機(jī)理。
　　(1)藍(lán)莓致腐菌的分離鑒定。以藍(lán)莓為研究對(duì)象，對(duì)藍(lán)莓致腐菌進(jìn)行分離與鑒定，通過對(duì)藍(lán)莓貯藏中致腐菌進(jìn)行分離，依據(jù)菌落形態(tài)的觀察以及生理生化試驗(yàn)，參考《伯霉菌鑒定

2、手冊(cè)》和《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》，再根據(jù)分子生物學(xué)鑒定結(jié)果:確定酵母Y1為孢漢遜酵母（Hanseniaspora guilliermondii），確定酵母Y2為隱球酵母（Cryptococcus aureus）。
　　(2)三種多糖的抑菌活性研究。采用水提法提取松針、艾蒿和蒿本三種多糖，用濾紙片法對(duì)多糖的抑菌活性作出了分析研究，確定三種多糖的最低抑菌濃度，再對(duì)其進(jìn)行最佳復(fù)配比正交試驗(yàn)，以抑菌圈直徑為衡量指標(biāo)，結(jié)果表明:影響因素的

3、主次順序?yàn)?松針多糖＞艾蒿多糖＞蒿本多糖，其最佳復(fù)配比為松針多糖∶艾蒿多糖∶蒿本多糖為3∶3∶2。表明復(fù)配多糖具有良好的抑菌活性，不僅為多糖的抑菌作用研究提供參考，而且為天然食品防腐劑的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。
　　(3)復(fù)配多糖對(duì)藍(lán)莓致腐菌抑菌及穩(wěn)定性研究。采用濾紙片法研究復(fù)配多糖的抑菌活性，結(jié)果表明復(fù)配多糖對(duì)藍(lán)莓致腐菌Y1和Y2均有較強(qiáng)的抑菌作用;復(fù)配多糖對(duì)大腸桿菌的最小抑制濃度為1.25mg/mL，對(duì)枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的

4、最小抑制濃度較高為2.5mg/mL;復(fù)配多糖對(duì)致腐菌Y1和Y2的最小抑制濃度為1.25mg/mL。穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果:復(fù)配多糖在中性、弱酸和弱堿性條件下抑菌活性較強(qiáng)，在酸性（堿性）條件下隨pH值的降低（升高）抑菌活性下降;常見金屬離子K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+對(duì)其穩(wěn)定性影響不大，但三價(jià)金屬Fe3+對(duì)其影響最大。
　　(4)多糖抑菌機(jī)理。從復(fù)配多糖對(duì)供試菌的生長(zhǎng)曲線、細(xì)胞溶出物、菌體形態(tài)和相對(duì)電導(dǎo)率四個(gè)方面對(duì)復(fù)配多糖抑菌機(jī)理進(jìn)行

5、初步探討。與對(duì)照生長(zhǎng)曲線相比，經(jīng)多糖處理過的菌種生長(zhǎng)曲線明顯下降;通過掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，對(duì)于多糖處理后的菌體出現(xiàn)明顯的溢裂，表面形成溝痕，并且伴有一定的萎縮跡象，菌體表面變得粗糙，并且發(fā)生嚴(yán)重的斷裂和溶解;隨著復(fù)配多糖濃度的增加，各供試菌種細(xì)胞溶出物的釋放量明顯提高;供試菌種多糖處理液的電導(dǎo)率隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，各菌種的胞內(nèi)離子的泄漏程度不斷增大，因此細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性會(huì)受到破壞。當(dāng)離子外流達(dá)到一定程度時(shí)，細(xì)胞就會(huì)由于代謝紊亂或溶脹破裂